IFNar1基因敲除小鼠是通過利用CRISPR/Cas9 技術(shù)，對小鼠的IFNar1基因進行靶向修飾。

粗蛋白≥23.0%、粗脂肪≥5.0%、粗灰分≤7.0%、粗纖維≤5.0%、水份≤10%、鈣1.4%～1.5%、磷1.0%～1.1%、賴氨酸≥1.32%、蛋氨酸+胱氨酸≥0.78%

1.生長曲線

2、解剖學(xué)特性與背景品系C57BL/6J相同。3、繁殖特性純合子之間同胞兄妹間繁殖，繁殖能力一般，每胎產(chǎn)5-7只。4、自發(fā)異常

不規(guī)則脾 脾臟黑色素沉積

1、靶基因位點選擇靶基因名稱：Interferon (alpha and beta) receptor 1 (IFNar1), 干擾素受體1基因ID號：15975； ENSEMBL號：ENSMUSG00000022967目標基因在ensembl網(wǎng)址鏈接：http://www.ensembl.org/Mus_musculus/Gene/Summary?g=ENSMUSG00000022967;r=16:91485238-91507441靶基因轉(zhuǎn)錄本：IFNar1基因有5個轉(zhuǎn)錄本，編碼蛋白大小為590aa?；蚪Y(jié)構(gòu)如下圖：

本研究以轉(zhuǎn)錄本IFNar1-201為對象進行基因編輯。 2、設(shè)計及構(gòu)建質(zhì)粒 利用CRISPR/Cas9技術(shù)，針對目的基因的插入位點尋找靶序列，根據(jù)靶序列信息設(shè)計針對該位點的guide RNA，經(jīng)活性檢測后，將具有活性的guide-RNA和Cas9體外轉(zhuǎn)錄成RNA，通過顯微注射將guide-RNA，Cas9 mRNA和重組DNA注射到受精卵中，從后代中篩選獲得基因定點插入的陽性小鼠。根據(jù)實驗?zāi)康暮鸵?，結(jié)合IFNar1基因信息，采取如下策略：針對小鼠IFNar1基因轉(zhuǎn)錄本201的外顯子1設(shè)計guide-RNA。該外顯子序列信息為：GGCGGGGCGTCGCGGAGGGCCTAGCTGCCCAGAGGTAGTCTCCAGCTCCGCGGTGCTGCTGAGGAGAAGGAGGAGAATGTGAGCCGCCGCCCGGCCTCCCAAGACGATGCTCGCTGTCGTGGGCGCGGCGGCCCTGGTGCTGGTGGCCGGGGCGCCTTGGGTGCTACCCTCAGCTGCAG上述序列經(jīng)crispr.mit.edu網(wǎng)站分析后，選擇可結(jié)合于IFNar1分子正鏈且編輯效率高、脫靶率低的一條gRNA（下?lián)Q線，黃色為PAM區(qū)）作為使用對象。該gRNA具體信息為GCTGGTGGCCGGGGCGCCTT。 3、 顯微注射及胚胎移植 gRNA經(jīng)體外合成、轉(zhuǎn)錄后與Cas9 RNA一起注射入C57BL/6小鼠受精卵細胞，受精卵細胞移植供體ICR小鼠。