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品系名稱:Shank3 敲除家犬
英文名稱:Shank3-knockout canine
疾病名稱:自閉癥
相關(guān)基因:Shank3
背景品系:比格犬
遺傳類型:基因敲除
繁殖方式:細(xì)胞注射、人工受精
繁殖代數(shù):3
研究用途:探索自閉癥病理治療
飼養(yǎng)環(huán)境:養(yǎng)殖基地動(dòng)物飼育區(qū)
培育單位:北京希諾谷生物科技有限公司
保種單位:北京希諾谷生物科技有限公司
資源鑒定:已通過實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型鑒定與評價(jià)工作委員會鑒定
鑒定日期:2020-10-09 00:00:00
1、孤獨(dú)癥合并癥:(1)運(yùn)動(dòng)能力:跑步機(jī)實(shí)驗(yàn)證明突變?nèi)嬖诓煌潭鹊倪\(yùn)動(dòng)協(xié)調(diào)能力損傷, 此外所有突變體都不能夠爬樓梯,突變體均運(yùn)動(dòng)協(xié)調(diào)能力異常。
(2)活動(dòng)與睡眠:通過活動(dòng)監(jiān)控儀實(shí)施 24 小時(shí)活動(dòng)監(jiān)測,發(fā)現(xiàn) Shank3 突變?nèi)归g活動(dòng)增加,睡眠碎片化;睡眠時(shí)間縮短,睡眠質(zhì)量差。
圖.1 自閉癥家犬 Shank3 敲除模型活動(dòng)與睡眠結(jié)果2、孤獨(dú)癥核心癥狀:(1) 狗狗同類社交:單箱實(shí)驗(yàn):同類社交“單箱”實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:突變?nèi)c陌生犬社交(嗅探、邀玩) 時(shí)間明顯減少,甚至出現(xiàn)夾尾、退縮等社交壓力的表現(xiàn),突變體在狗與狗社交能力方面存在缺陷。
圖.2 自閉癥家犬 Shank3 敲除模型單箱實(shí)驗(yàn)結(jié)果(2)狗與人異類社交“求助”實(shí)驗(yàn):突變?nèi)c人的社交互動(dòng)明顯減少,在“困境”時(shí)無法及時(shí)的通過眼神交流向人類發(fā)出求助,社交依賴性比較弱,社交缺陷。
圖.3 自閉癥家犬 Shank3 敲除模型求助實(shí)驗(yàn)結(jié)果
(3)刻板行為:突變體在沒有皮膚炎癥的情況下,自我抓撓、舔舐、刨籠子等行為明顯增多,刻板行為明顯。Shank3 基因編輯犬純合 F0 代和雜合 F1 代在同類犬犬社交(經(jīng)典的“三箱” 實(shí)驗(yàn))、異類犬人社交中均存在社交缺陷(社交時(shí)間減少、社交壓力增加)、刻板重復(fù)性行為等孤獨(dú)癥核心癥狀;此外模型犬同樣存在運(yùn)動(dòng)能力減弱、睡眠障礙等合并癥狀。以上表型較好的重復(fù)了臨床孤獨(dú)癥患兒表型,是較為理想的孤獨(dú)癥研究的疾病動(dòng)物模型。
SHANK3 是目前研究最深入的幾個(gè)孤獨(dú)癥致病基因之一,該基因突變導(dǎo)致的病例約占孤獨(dú)癥譜系障礙總病例的 1%。含有 SHANK3 染色體區(qū)域的大片 段 缺 失 會 導(dǎo) 致 22q13.3 缺 失 綜 合 癥(Phelan-McDermid Syndrome, PMS)。22q13.3 缺失綜合癥病人缺失片段的大小可以從 0.1 Mb 到 10 Mb 不等,臨床癥狀主要為肌肉張力減退、發(fā)育遲緩、語言缺失或滯后以及智力障礙,其中 75%的病人也被診斷為孤獨(dú)癥譜系障礙。
通過對家犬的全基因組序列分析,發(fā)現(xiàn)在家犬中Shank3 基因結(jié)構(gòu)與小鼠和人類相似,全部具有 22 個(gè)外顯子。 家犬 Shank3 基因第 21 號外顯子編碼一個(gè)富含脯氨酸的保守區(qū)域,該區(qū)域是孤獨(dú)癥患者發(fā)生突變的熱點(diǎn)。因此,我們針對第 21 號外顯子進(jìn)行基因編輯(sgRNA 2 和 3),同時(shí)針對第 5 和第 21 號外顯子兩個(gè)位點(diǎn)(sgRNA 1 和 3)誘導(dǎo) Shank3 的無效等位基因。目前公司擁有 Shank3 21 號外顯子片段刪除、5~21 號外顯子 33Kb 大片段刪除的F0 代以及不同基因類型的大量雜合F1 代。膨化顆粒飼料
狗狗同類社交、人狗異類社交均存在明顯的缺陷,并且具有典型的重復(fù)刻板行為。
暫無介紹
北檢院實(shí)驗(yàn)室百余臺大型試驗(yàn)儀器,適用于各種材料的樣品,并且還有非標(biāo)試驗(yàn)的工裝定制服務(wù)。
實(shí)驗(yàn)室工程師有著豐富的測試經(jīng)驗(yàn),無論是常規(guī)樣品還是科研樣品,都有定制化試驗(yàn)方案。
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1.具體的試驗(yàn)周期以工程師告知的為準(zhǔn)。
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