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注意：因業(yè)務(wù)調(diào)整，暫不接受個(gè)人委托測(cè)試望見(jiàn)諒。

基本信息

品系名稱(chēng)：B6-Fezf2^tm1小鼠

英文名稱(chēng)：B6-Fezf2^tm1 mouse

疾病名稱(chēng)：神經(jīng)管畸形

相關(guān)基因：Fezf2

背景品系：C57BL/6J

遺傳類(lèi)型：基因敲除

繁殖方式：HOM X HOM

繁殖代數(shù)：NA

研究用途：用于研究神經(jīng)管畸形、神經(jīng)發(fā)育及信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。

飼養(yǎng)環(huán)境：屏障或隔離環(huán)境

培育單位：北京華阜康生物科技股份有限公司、中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究所

保種單位：中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究所

資源鑒定：否

鑒定日期：暫無(wú)介紹

特征描述

Fez家族鋅指蛋白2(Fezf2，又名Fezl，Zfp3 12)，選擇性地表達(dá)于大腦皮質(zhì)第V和Ⅵ皮層的下行性投射錐體神經(jīng)元以及其前體細(xì)胞中。近來(lái)研究證實(shí)，F(xiàn)ezf2表達(dá)缺失對(duì)于第V和Ⅵ皮層錐體神經(jīng)元的產(chǎn)生，移行和存活沒(méi)有顯著影響，但使下行性投射神經(jīng)元投射至皮下靶區(qū)的軸突數(shù)量明顯減少，而保留的皮質(zhì)下軸突投射失去了典型的緊密聯(lián)系的組織構(gòu)造。對(duì)正常情況下不表達(dá)Fezf2的第1I和III皮層研究發(fā)現(xiàn)，其Fezf2的的異位表達(dá)使上皮質(zhì)神經(jīng)元獲得了一定的下行性投射錐體神經(jīng)元的分子特性。這些結(jié)果都說(shuō)明Fezf2對(duì)于皮質(zhì)下軸突投射的形成和成束是必須的，且對(duì)其誘導(dǎo)和定向是充分的。另外，有研究證明，F(xiàn)ezf2可能與Ctip2形成信號(hào)通路，對(duì)神經(jīng)元皮質(zhì)下投射起到到了調(diào)控作用。異位表達(dá)Fezf2或者Ctip2均能使皮質(zhì)問(wèn)投射神經(jīng)元產(chǎn)生皮質(zhì)下投射。Fezf2是皮質(zhì)深層錐體神經(jīng)元的一個(gè)特異性標(biāo)志物，其表達(dá)開(kāi)始于產(chǎn)生這些神經(jīng)元的早期VZ前體細(xì)胞。后期皮質(zhì)前體細(xì)胞中Fezf2轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的缺失顯示，當(dāng)上層皮質(zhì)神經(jīng)元形成時(shí)Fezf2的表達(dá)被關(guān)閉。當(dāng)神經(jīng)元形成分化后， Fezf2表達(dá)在深皮質(zhì)皮下投射神經(jīng)元中。這些研究表明Fezf2除了在早期VZ前體細(xì)胞中可能存在的作用外，也在深層錐體神經(jīng)元中具有重要作用。Molyneaux et a1．等也報(bào)導(dǎo)了，F(xiàn)ezf2對(duì)皮質(zhì)脊髓的運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元的產(chǎn)生和細(xì)化是必要的。

除了在大腦發(fā)育過(guò)程中起作用外，F(xiàn)ezf2在成熟小鼠、斑馬魚(yú)等動(dòng)物體內(nèi)仍有很高量的表達(dá)，但至于此時(shí)它所起的作用還不得而知。最近又有研究報(bào)導(dǎo)，F(xiàn)ezf2表達(dá)在成年斑馬魚(yú)端腦室區(qū)的放射狀神經(jīng)膠質(zhì)前體細(xì)胞中，并與神經(jīng)干細(xì)胞和增殖細(xì)胞的標(biāo)記物表達(dá)一致。另外發(fā)現(xiàn)，在成年斑馬魚(yú)中，視前區(qū)核丘腦下部是表達(dá)Fezf2的神經(jīng)元發(fā)生地，此時(shí)Fezf2標(biāo)記了前體細(xì)胞和分裂后的神經(jīng)元。由此，作者建立了以Fezf2作為成年端腦室區(qū)前體細(xì)胞的一個(gè)新的標(biāo)記物，這為之后Fezf2在成年脊椎動(dòng)物中神經(jīng)干細(xì)胞的保持和分化中所起的作用奠定了基礎(chǔ)。

作為轉(zhuǎn)錄因子的蛋白在胞漿中合成后轉(zhuǎn)運(yùn)入核，其入核的時(shí)間往往與特定的生命活動(dòng)緊密聯(lián)系。例如，細(xì)胞周期依賴(lài)性激酶5(Cdk5)，表達(dá)在缺乏血清培養(yǎng)基中培養(yǎng)的NIH 3T3細(xì)胞的胞核中，當(dāng)向培養(yǎng)基中加入血清后，細(xì)胞中的Cdk5呈現(xiàn)從胞核到胞漿的移動(dòng)。而將Cdk5限制在胞核中后，破壞了細(xì)胞增殖周期，抑制了細(xì)胞分裂。此外還有許多研究，包括SIRTl，CRMP2，F(xiàn)OXP2等多種轉(zhuǎn)錄因子的入核行為已證實(shí)與特定的細(xì)胞活動(dòng)密切相關(guān)。另如，轉(zhuǎn)錄因子Otxl，在胚胎的發(fā)育早期階段(E13-E15)，高表達(dá)在側(cè)腦室前體細(xì)胞的胞漿中，在胚胎發(fā)育后期(E17一E19)和新生初期(P1-P3)，表達(dá)在胞漿和胞核中，而在較為成熟的P13時(shí)的神經(jīng)元中，則發(fā)現(xiàn)Otxl限制性表達(dá)在胞核中。這種從胞漿到胞核的遷移過(guò)程發(fā)生在出生后一周，正是深層皮質(zhì)神經(jīng)元皮下軸突投射發(fā)生修剪的時(shí)期。說(shuō)明其在核內(nèi)的限制性表達(dá)模式很有可能與軸突的定向投射，修剪等行為存在關(guān)聯(lián)性。

Fezf2表達(dá)的高峰出現(xiàn)于新形成的神經(jīng)細(xì)胞中，此時(shí)軸突投射和突觸正處于形成和完善過(guò)程中，這讓我們猜測(cè)，其入核行為是否與該階段關(guān)鍵的軸突發(fā)育過(guò)程有關(guān)。

真核細(xì)胞的核膜是控制細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核之間進(jìn)行物質(zhì)交換的通透屏障。核孔復(fù)合物(nuclearporecomplexs，NPCs)是核內(nèi)外物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)的通道。雖然大多數(shù)相對(duì)分子質(zhì)量小于60000的蛋白質(zhì)或直徑在9nm以下的物質(zhì)都能通過(guò)核孔復(fù)合體而自由擴(kuò)散，但是大分子蛋白質(zhì)及許多特殊的小分子蛋白質(zhì)必須通過(guò)其核定位信號(hào)(Nuclear localization signal，NLS)經(jīng)主動(dòng)運(yùn)輸進(jìn)入核內(nèi)。NLS是一種存在于細(xì)胞內(nèi)許多蛋白質(zhì)中，并介導(dǎo)蛋白質(zhì)由細(xì)胞質(zhì)向細(xì)胞核內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)的氨基酸序列，具有多樣性，作用機(jī)制也各有不同。近年來(lái)，關(guān)于核定位信號(hào)的研究已有很多并已被應(yīng)用于功能研究及疾病的治療等方面。目前已知的NLS可分為以下幾類(lèi)：①單一型(monopartite)NLS。最初發(fā)現(xiàn)存在于猿猴病毒40(SV40)的大T抗原中，是一個(gè)包含7個(gè)氨基酸(PKKKRKV)的短肽?，F(xiàn)己證實(shí)，單一型NLS是～個(gè)由4～8個(gè)氨基酸組成的短肽，富含帶正電荷的Lys和舡g，通常還含有Pro。含有此類(lèi)NLS的蛋白除SV40大T抗原外，還有MDM2，NF—κB，CDc25C等。②雙分型(bipartite)NLS。此種NLS是由兩簇堿性氨基酸組成，中間由10～12個(gè)非保守性氨基酸所分隔而形成的序列。 例如： 核質(zhì)蛋白的NLSKRPAATKKAGQAKKKK(黑體部分)。含有此類(lèi)NLS的蛋白質(zhì)還有MTAl，帽結(jié)合蛋白，CBP80等。上述兩類(lèi)典型的NLS蛋白質(zhì)的核輸入介導(dǎo)蛋白可能相同。③其他類(lèi)型NLS。除上述兩類(lèi)典型的NLS外，還有一些無(wú)一定的序列特征的NLS，它們主要存在于能在細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)問(wèn)穿梭的蛋白質(zhì)中，包括M9，Rev，STAR-NLS，hTAP等。這些蛋白的NLS中，均含有三個(gè)或三個(gè)以上連續(xù)的帶正電荷的堿性氨基酸。

從目前發(fā)表的文獻(xiàn)來(lái)看，核定位信號(hào)的研究都是在體外培養(yǎng)的細(xì)胞上進(jìn)行，使得NLS在體生命活動(dòng)中所發(fā)揮的作用，功能以及其應(yīng)用的研究具有一定的局限性，在體功能還有待進(jìn)一步證實(shí)。

另外，F(xiàn)ezf2屬于鋅指蛋白家族成員，鋅指蛋白(zinc finger protein)是哺乳動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)含量最豐富的蛋白質(zhì)模體(motif)，是各種特異性DNA結(jié)合蛋白質(zhì)中最大的一個(gè)類(lèi)別。具統(tǒng)計(jì)大約有1％的人類(lèi)基因(700至900個(gè))編碼鋅指蛋白。這些鋅指蛋白由于其自身的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，可以選擇性的結(jié)合特異的靶結(jié)構(gòu)，使其在基因的表達(dá)調(diào)控、細(xì)胞分化、胚胎發(fā)育等生命過(guò)程中發(fā)揮重要作用。結(jié)合有鋅的神經(jīng)元也被稱(chēng)為“含鋅神經(jīng)元"，該類(lèi)神經(jīng)元似乎在哺乳動(dòng)物的大腦皮質(zhì)中組成了一條“化學(xué)專(zhuān)線(xiàn)"。鋅對(duì)于這類(lèi)神經(jīng)元中眾多的蛋白的結(jié)構(gòu)和功能都起到了非常重要的作用，包括調(diào)控，結(jié)構(gòu)和酶活性。在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中，鋅離子還有另外的作用，它富集于一類(lèi)特定的偶發(fā)神經(jīng)元的突觸囊泡中，作為神經(jīng)分泌因子或者輔因子。

大多數(shù)鋅類(lèi)神經(jīng)元都是谷氨酸能神經(jīng)元，但只有部分的谷氨酸能神經(jīng)元才是鋅類(lèi)神經(jīng)元。這種相關(guān)性似乎說(shuō)明鋅在神經(jīng)元細(xì)胞中對(duì)于谷氨酸鹽的儲(chǔ)存，釋放及重吸收或?qū)劝彼猁}受體的調(diào)控方面可能起到了重要的作用。

盡管如此，我們對(duì)于大腦中含鋅類(lèi)神經(jīng)元所形成的神經(jīng)回路起到的作用仍舊知之甚少。從1967年Finn-MogensHaug首次發(fā)現(xiàn)含鋅的突觸前囊至今已有四十多年了，但這方面的研究時(shí)常被忽略。關(guān)于為什么鋅會(huì)富集于某些神經(jīng)元的囊泡中這個(gè)問(wèn)題，至今仍少有探究。Fezf2作為典型的鋅指蛋白，雖然從結(jié)構(gòu)上預(yù)測(cè)可能為轉(zhuǎn)錄因子，但不能排除其作為鋅結(jié)合蛋白在含鋅神經(jīng)元中參與調(diào)節(jié)谷氨酸受體的表達(dá)。同時(shí)，從結(jié)構(gòu)上分析，F(xiàn)ezf2也缺少典型的入核信號(hào)，因此，F(xiàn)ezf2也可能在細(xì)胞漿中發(fā)揮作用【1】。

有報(bào)道指出Fezf2在小鼠中自E10．5的側(cè)腦室前體細(xì)胞中開(kāi)始至新生早期，一直定位于細(xì)胞核中； Fezf2含有主動(dòng)入核的多肽，可以將大分子(倆個(gè)GFP)帶入核內(nèi)；在Fezf2基因中，位于704-1132的堿基序列，對(duì)應(yīng)第219．362位的氨基酸序列對(duì)于入核行為起到關(guān)鍵作用；3 18位的組氨酸(H)是入核所必需的【1】。

有報(bào)道指出， Fezf2基因與神經(jīng)管缺陷（NTDs）有關(guān)。 此外，研究Fezf2基因是否與Notch和Wnt/β-catenin信號(hào)通路有關(guān)，檢測(cè)相關(guān)蛋白的表達(dá)，如Hes5、Notch1、DLL3【2】。

有報(bào)道指出，選取了斑馬魚(yú)間腦神經(jīng)發(fā)育為研究對(duì)象,探究了調(diào)控神經(jīng)分化的機(jī)制,發(fā)現(xiàn)在進(jìn)化中保守的前腦特異鋅指結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)錄因子Fezf2(又稱(chēng)為Fezl)能夠調(diào)控間腦結(jié)節(jié)后和下丘腦區(qū)域(PT/H區(qū)域)多種神經(jīng)元協(xié)調(diào)產(chǎn)生。Fezf2功能喪失不僅影響PT/H區(qū)域多巴胺能神經(jīng)元、5-羥色胺能神經(jīng)元和催產(chǎn)素能神經(jīng)元的發(fā)育,也會(huì)導(dǎo)致該區(qū)域GABA神經(jīng)元和其它一些Islet1陽(yáng)性中間神經(jīng)元的缺失；在早期神經(jīng)元發(fā)育受損的同時(shí),少突神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞前體細(xì)胞標(biāo)志之一Olig2的表達(dá)卻增加了。進(jìn)一步的分析發(fā)現(xiàn),受Fezf2影響的PT/H區(qū)域多巴胺能神經(jīng)元、5-羥色胺能神經(jīng)元和GABA神經(jīng)元在發(fā)育的相同階段產(chǎn)生。與不同神經(jīng)前體細(xì)胞分化和不同神經(jīng)元命運(yùn)相關(guān)的proneural基因neurogenin1和ascl1a以及在多巴胺能神經(jīng)元中表達(dá)的otpb和在分化中的GABA神經(jīng)元中表達(dá)的dlx2都是Fezf2作用的下游因子,表明Fezf2通過(guò)在發(fā)育早期建立表達(dá)不同proneural基因的神經(jīng)前體細(xì)胞群體來(lái)協(xié)調(diào)不同類(lèi)型神經(jīng)元的發(fā)育,同時(shí)也能調(diào)控在特異神經(jīng)元中表達(dá)的決定因子,在發(fā)育的不同階段調(diào)控了神經(jīng)細(xì)胞的命運(yùn)。Fezf2激活前體細(xì)胞中proneural基因的表達(dá)能夠活化相鄰細(xì)胞中的Notch信號(hào)通路,而活化了的Notch信號(hào)通路則抑制fezf2的表達(dá)。由此可見(jiàn),前腦特異的轉(zhuǎn)錄因子Fezf2能夠調(diào)控多種神經(jīng)元的協(xié)調(diào)發(fā)育并受到Notch信號(hào)通路的負(fù)反饋調(diào)控。事實(shí)上,存在于特定區(qū)域前體細(xì)胞中的調(diào)控因子(如前腦中的Fezf2)與Notch信號(hào)通路間的相互調(diào)控可能是在器官發(fā)育過(guò)程中協(xié)調(diào)不同類(lèi)型細(xì)胞有序產(chǎn)生的普遍機(jī)制【3】。

動(dòng)物簡(jiǎn)介

營(yíng)養(yǎng)成分

生物學(xué)特性

實(shí)驗(yàn)儀器

測(cè)試流程

注意事項(xiàng)

1.具體的試驗(yàn)周期以工程師告知的為準(zhǔn)。

2.文章中的圖片或者標(biāo)準(zhǔn)以及具體的試驗(yàn)方案僅供參考，因?yàn)槊總€(gè)樣品和項(xiàng)目都有所不同，所以最終以工程師告知的為準(zhǔn)。

3.關(guān)于（樣品量）的需求，最好是先咨詢(xún)我們的工程師確定，避免不必要的樣品損失。

4.加急試驗(yàn)周期一般是五個(gè)工作日左右，部分樣品有所差異

5.如果對(duì)于（B6-Fezf2tm1小鼠,動(dòng)物試驗(yàn)）還有什么疑問(wèn)，可以咨詢(xún)我們的工程師為您一一解答。