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基本信息

品系名稱：B6-IL27^tm1小鼠

英文名稱：B6-IL27^tm1 mouse

疾病名稱：腫瘤、自身免疫疾病、炎癥、傳染性疾病

相關(guān)基因：IL-27

背景品系：C57BL/6J

遺傳類型：基因敲除

繁殖方式：HOM X HOM

繁殖代數(shù)：NA

研究用途：用于研究腫瘤、自身免疫疾病、炎癥、傳染性疾病等及信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)方面的研究。

飼養(yǎng)環(huán)境：屏障或隔離環(huán)境

培育單位：北京華阜康生物科技股份有限公司、中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究所

保種單位：中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究所

資源鑒定：否

鑒定日期：暫無介紹

特征描述

1IL-27組成及其產(chǎn)生

IL-27是 2002年6月美國(guó)DNAX 研究所的Pflanz等發(fā)現(xiàn)并命名的一種新的IL-6/IL-12家族細(xì)胞因子，由 EBI3(與 IL-12p40亞基同源)和 p28(與IL-12p35亞基 同源 )兩條多肽鏈通過二硫鍵連接構(gòu)成的異源二聚體。EBI3是一種可溶性細(xì)胞因子受體，最初在 EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞培養(yǎng)上清中被發(fā)現(xiàn)，后來在體內(nèi)的研究中發(fā)現(xiàn)活化的抗原提呈細(xì)胞亦可高效表達(dá)EBI3，由于其缺乏膜結(jié)合位點(diǎn)故被認(rèn)為是一種分泌蛋。p28是 Pflanz等在基因庫中找到的一種與 IL-6／IL-12家族細(xì)胞因子同源的長(zhǎng)鏈四螺旋多肽，人p28基因位于染色體 16pl1上。p28在人和鼠的同源性為73％，它的 cDNA序列分別編碼243和 234個(gè)氨基酸多肽，蛋白質(zhì)分子量分別為24.5和 23.6kDa。IL-27與 IL-12的其它兩種家族成員 IL-l2和IL-23這三種細(xì)胞因子都是包含相關(guān)螺旋亞單位(IL-12p35、IL-23p19和 IL-27p28)及可溶性細(xì)胞因子受體亞單位 (IL-12p40、IL-23p40和 IL-27EBI3)的異源二聚體 ，因此在結(jié)構(gòu)上具有高度相似性 ，而且均由活化的抗原提呈細(xì)胞即單核巨噬細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞 (dendritic cells，DCs)產(chǎn)生。EBI3的表達(dá)與病原體或宿主受到 LPS、CD40配體及炎癥性細(xì)胞因子刺激有關(guān)。與 IL-12p35相似 ，IL-27p28必須和 EBI3結(jié)合后才能被有效地分泌到細(xì)胞外發(fā)揮免疫功能。病理情況下 IL-27的高表達(dá)發(fā)生于感染 Mycobacteriatuberculosis、Trichurismuris和 Toxoplasmagondii等病原體后發(fā)生炎癥反應(yīng)階段。同樣 ，IL-27也高表達(dá)于 自身免疫性疾病如人類 Crohn’S病以及小鼠多發(fā)性硬化(multiple sclerosis，MS)、實(shí)驗(yàn)性腦脊髓膜炎(experiment autoimmune encephalomyelitis，EAE)和慢性 T．gondii感染等中樞神經(jīng)系統(tǒng)的星形膠質(zhì)細(xì)胞和小膠質(zhì)細(xì)胞。刺激人類單核細(xì)胞起源的樹突狀細(xì)胞 (monocyte—derived DCs，MoDCs)和 小鼠骨髓起源的樹 突狀細(xì)胞 bone marrow—derived dendritic cells，BMDCs)以及應(yīng)用toll樣受體激動(dòng)劑 (toll—like receptor，TLR)刺激單核巨噬細(xì)胞能夠升高 IL-27的表達(dá)[1]。

IL-27促進(jìn) 1型免疫反應(yīng)

IL-27在促進(jìn) Thl型免疫反應(yīng)中起重要作用。機(jī)體對(duì)胞內(nèi)病原體感染的控制需要建立有效的Thl型免疫反應(yīng)。從初始 CD4+T細(xì)胞向 Thl細(xì)胞分化時(shí)需要 細(xì)胞受體的激活和抗原提呈細(xì)胞分泌的Thl型細(xì)胞因子的刺激作用。許多體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，如果小鼠缺乏IL-27R則 Thl型免疫反應(yīng)減弱，提示IL-27／IL-27R可能直接參與 Thl細(xì)胞分化和促進(jìn)初始 CD4+T細(xì)胞的增殖而增強(qiáng) Thl型免疫反應(yīng)的發(fā)生。最初研究認(rèn) 為，抗原提呈細(xì)胞只有在 IL-12存在的情況下才能夠產(chǎn)生 IL-27，并進(jìn)一步活化初始CD4+T細(xì)胞和 NK細(xì)胞產(chǎn)生 IFN-γ。IL-12是促進(jìn)Thl細(xì)胞發(fā)育的關(guān)鍵性細(xì)胞因子，它通過激活STAT4促進(jìn)初始 CD4+T細(xì)胞向 Thl細(xì)胞分化。然而靜息的初始 CD4+T細(xì)胞不表達(dá) IL-l2受體的B2亞單位(IL-12Rβ2)，而 T-bet是在 Thl細(xì)胞發(fā)育過程中具有中心作用的轉(zhuǎn)錄因子，T-bet的一個(gè)重要功能就是誘導(dǎo)初始 CD4+T細(xì)胞 IL-12Rβ2的表達(dá) ，使其獲得對(duì) IL-12的反應(yīng)性 。故 IL-27協(xié)同 IL-12促進(jìn)初始 CD4+T細(xì)胞產(chǎn)生IFN-γ的機(jī)制被認(rèn)為是：IL-27通過 T-bet誘導(dǎo)IL-12Rβ2的表達(dá) ，進(jìn)而在IL-12的作用下向 Thl細(xì)胞分化并分泌 IFN-γ。但后來研究證明，病原體或 LPS也可以 IL-12非依賴的形式刺激抗原提呈細(xì)胞分泌 IL-27，進(jìn)而作用于CD4+T細(xì)胞和 NK細(xì)胞。其分子基礎(chǔ)可能是 IL-27R活化 STAT1，增加轉(zhuǎn)錄子 T-bet表達(dá) ，進(jìn)而作用于靶基因 IL一12Rβ2和 IFN-γ等的轉(zhuǎn)錄 。Lucas等研究發(fā)現(xiàn)在無 IL-12存在時(shí) ，IL-27還可上調(diào)初始CD4+T細(xì)胞 ICAM-1的表達(dá)，通過ICAM-1／LFA-1(LFA-1由抗原提呈細(xì)胞表達(dá))的相互作用促進(jìn)其向Thl細(xì)胞分化 ，說明 IL-27亦可通過與IL-12不同的途徑促進(jìn)Th1分化。IL-27的這種作用通過也是STAT1介導(dǎo)而不依賴STAT4，STAT3可能在IL-27誘導(dǎo)初始 CD4+T細(xì)胞增殖反應(yīng)中發(fā)揮重要作用 ，因此，IL-27通過不同的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑發(fā)揮不同生物學(xué)活性。

IL-27對(duì) Thl型免疫的負(fù)調(diào)控作用

IL-27不僅能夠促進(jìn)初始CD4+T細(xì)胞的增殖和向Thl細(xì)胞分化而增強(qiáng) Thl型免疫反應(yīng)的發(fā)生，也可對(duì)Thl反應(yīng)發(fā)揮反饋調(diào)控作用，能夠限制 Thl型免疫反應(yīng)的強(qiáng)度和持續(xù)時(shí)間，以防止機(jī)體過度免疫反應(yīng)引起的病理性損傷 。因此，IL-27對(duì)Thl型免疫反應(yīng)具有雙重調(diào)節(jié)作用。

感染T.gondii的IL-27R-/-小鼠雖然能建立有效的Thl型免疫反應(yīng)，但是在感染后期不能下調(diào)這種保護(hù)性反應(yīng)，IL-27 R-/-小 鼠 Thl細(xì) 胞 較 正 常 Thl細(xì)胞具有更強(qiáng)的增值反應(yīng)，最終發(fā)展成以過量IFN-γ產(chǎn)生及 T細(xì)胞過增殖為特征的致死性炎癥反應(yīng)，提示 IL-27可通過抑制Thl細(xì)胞增殖而控制Thl型免疫的強(qiáng)度。同樣 ，與野生型小鼠相比，感染Trypanosma cruzi（T.cruzi)的 IL-27R 小鼠發(fā)生Thl介導(dǎo)的嚴(yán)重肝臟損傷，。Holscher究表明雖然在感染 Mycobacterium tubercuzosis后病原體清除依賴于 Thl型細(xì)胞免疫反應(yīng)中 CD4+T細(xì)胞和IFN-γ 的產(chǎn)生，在 IL-27R-／-小 鼠感染結(jié)核晚期卻產(chǎn)生大量IFN-γ 等促炎細(xì)胞因子，引起廣泛的炎癥反應(yīng)而加速了死亡。Yamanakaiz采用注射ConA誘導(dǎo)肝炎的非病原體感染的小鼠動(dòng)物模型研究表明缺乏IL-27后NKT細(xì)胞能夠產(chǎn)生大量的IFN-γ 使其易感性增加。這些研究提示IL-27對(duì)過度Thl型免疫反應(yīng)具有抑制作用。IL-27R-／-小 鼠是公認(rèn)的促進(jìn)Thl增殖和維持其生存的細(xì)胞因子，在體外分化實(shí)驗(yàn)中，IL-27R小鼠的CD4+T細(xì)胞產(chǎn)生的IL-2比野生型的多而加人rlL-27能抑制 IL-2mRNA和蛋白的表達(dá)，說明IL-27有抑制 IL-2產(chǎn)生的作用。此外，IL-27可以協(xié)同 IL-12抑制 IL-2的分泌，因而IL-27和 IL-12都具有抑制 IL-2的作用，而相關(guān)的細(xì)胞因子IL-6和IL-23沒有這種特性。IL-27抑制 IL-2產(chǎn)的作用依賴 STAT1途徑，而不是STAT3、STAT4和 T-bet，這種抑制作用與抑制性細(xì)胞因子信號(hào) (suppressor of cytokine signaling，SOCS)3 的表達(dá)高度相關(guān)，而SOCS3是一種炎癥反應(yīng)的抑制性蛋白。IL-27誘生的 SOCS3的表達(dá)在Thl效應(yīng)的負(fù)反饋調(diào)節(jié)機(jī)制中起著關(guān)鍵性的作用。 因此，IL-27能夠通過上調(diào)SOCS3的表達(dá)抑制lL-2的分泌和IL-2介導(dǎo)的Thl型細(xì)胞增殖。

IL-27可作為 Th2型反應(yīng)的抑制劑

IL-27不僅可對(duì)Thl反應(yīng)起負(fù)調(diào)控作用，對(duì) Th2反應(yīng)也可發(fā)揮抑制作用 。體外實(shí)驗(yàn)利用分選的小鼠cD4+T 細(xì)胞研究發(fā)現(xiàn) ，盡管IL-4能夠促進(jìn) IL-13的分泌 ，但給予IL-27后 IL-13的分泌量明顯降低。Th2分化過程 中，IL-27R 的 CD4+T細(xì)胞比野生型CD4+T產(chǎn)生更多的 IL-5和 IL-13，說明 IL-27直接抑制 CD4+T細(xì)胞產(chǎn)生IL-4。在體內(nèi)試驗(yàn)中，L．major感染早期產(chǎn)生以 IL-4高表達(dá)為特征性的免疫反應(yīng)，利用IL-27R-／-小鼠建立動(dòng)物模型研究發(fā)現(xiàn)，小鼠表現(xiàn)出的早期易感性與 Th2反應(yīng)的加強(qiáng)和Thl細(xì)胞產(chǎn)生減少有關(guān)，這與普遍認(rèn)同的 IL-27提高Thl活性的觀點(diǎn)一致 ，但在感染晚期因?yàn)槿狈?IL-27R形成了 L．major特異性 Thl細(xì)胞并控制了感染。在此過程中IL-27的主要作用是限制了早期 Th2活性而不是影響Thl型免疫反應(yīng)。預(yù)先給與 WSX-1-／- 鼠IL-4特異性抗體能夠逆轉(zhuǎn)此早期易感性，說明缺乏IL-27則可使Th2活性增強(qiáng)。同樣，在哮喘和腎小球腎炎動(dòng)物模型中，缺乏 IL-27R的小鼠炎癥反應(yīng)加劇與Th2反應(yīng)增強(qiáng)有關(guān)。IL-27通過抑制轉(zhuǎn)錄子GATA-3的表達(dá)直接抑制 Th2反應(yīng)的效應(yīng)與加強(qiáng)IFN-γ產(chǎn)生的能力無關(guān)。GATA-3是 IL-4誘導(dǎo)產(chǎn)生的促進(jìn) Th2細(xì)胞發(fā)育的一種關(guān)鍵的轉(zhuǎn)因子 ，它能引起多種Th2型細(xì)胞 因子(如 IL一4，IL-13)的轉(zhuǎn)錄 ，還可以通過抑制IL-12Rβ2和 STAT4的表達(dá)而阻斷 Thl細(xì)胞的分化 ，IL-27正是通過GATA-3途徑 抑制 Th2型反應(yīng)。

IL-27可抑制 Thl7細(xì)胞的分化

Thl7細(xì)胞作為T輔助細(xì)胞家族的一個(gè)獨(dú)立譜系已經(jīng)從傳統(tǒng)的 Thl和Th2細(xì)胞中分離 出來。最近有研究者用 WSX-1-／- 小鼠對(duì)自身免疫性腦脊髓炎的研究結(jié)果表明，缺乏IL-27信號(hào)導(dǎo)致的炎癥反應(yīng)加重與炎癥組織中表達(dá)IL-17的T細(xì)胞數(shù)量增多有關(guān)。盡管 IFN-γ 受體參與了抑制 Thl7細(xì)胞分化，IL-27對(duì) IFN-γ小鼠的T細(xì)胞或抗原提呈細(xì)胞的分化仍起到抑制作用，說明陔抑制作用不依賴于INF-γ受體的存在。STAT1信號(hào)系統(tǒng)是IL-27和IFN-γ在細(xì)胞內(nèi)的共同途徑，在 STAT1 ko 小 鼠IL-27不能抑制 IL-17的產(chǎn)生，而對(duì)自身免疫性腦脊髓炎易感性增加，說明 IL-27可通過STATI途徑起作用 ，但 STAT1途徑的下游基因和具體調(diào)節(jié)通路仍需深入研究。還有研究表明，IL-27還可通過下調(diào) IL-6和 TGF-β的表達(dá)對(duì)Thl7細(xì)胞的分化起抑制作用。而 T-bet和抑制蛋白 SOCS3在 IL-27抑制 Th17細(xì)胞分化中不起作用。IL-27也可以通過下調(diào) IL-6抑制 CD4+T細(xì)胞增殖，這說明IL-27抑制Thl7細(xì)胞分化 的作用與前面討論的 IL-27對(duì)病原體感染免疫反應(yīng)的負(fù)調(diào)控作用相一致。

IL-27對(duì)調(diào)節(jié)性 T細(xì)胞的作用

IL-27不僅Th細(xì)胞有重要的調(diào)節(jié)作用，還能夠通過 TGF-β的作用抑制誘導(dǎo)型調(diào)節(jié)性 T細(xì)胞(inducible regulatory T cells，iTregs)的分化與增殖 ，這一點(diǎn)與上述IL-27的抗炎作用相一致。然而，IL-27抑制誘導(dǎo)型調(diào)節(jié)性T細(xì)胞產(chǎn)生的體內(nèi)實(shí)驗(yàn)研究還未見報(bào)道，IL-27受體亞單也高水平表達(dá)于調(diào)節(jié)性 T細(xì)胞 的另外一個(gè)亞群CD4+CD25+天然型調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(natural regulatory T cells)，但至今尚未證實(shí)IL-27對(duì)其發(fā)揮促進(jìn)作用還是抑制作用。

IL-27在炎癥性疾病中的作用

IL-27通過抑制特異性Th亞群細(xì)胞子的產(chǎn)生抑制炎癥反應(yīng)的強(qiáng)度并發(fā)揮抗炎活性。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，WSX-1-／- 小鼠對(duì)Listeriamonocytogen。es和L.major的易感性增加，伴有 IL-6、TNF-γ 和 TNF-γ等炎癥細(xì)胞因子產(chǎn)生的增加 ，表明 IL-27在抵御 細(xì)胞內(nèi)病原體感染的Thl型免疫中可能發(fā)揮一定的作用。而在小鼠 gondii和 cruzi及結(jié)核菌感染過程中，IL-27主要表現(xiàn)為限制 Thl型免疫反應(yīng)的強(qiáng)度， WSX-1-／- 小鼠表現(xiàn)為產(chǎn)生過量IFN-γ 而形成了嚴(yán)重的肝臟壞死，這說明在不同病原體感染時(shí)細(xì)胞 因子的產(chǎn)生和相互作用情況不同。

IL-27對(duì)自身免疫性疾病的治療也有重要作用。前已述及，IL-27被認(rèn)為參與自身免疫性疾病的發(fā)生并且可以控制免疫反應(yīng)的強(qiáng)度和持續(xù)時(shí)間。在由Thl反應(yīng)介導(dǎo)的實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓膜炎和自身免疫性關(guān)節(jié)炎動(dòng)物模型中，給與外源性的抗IL-27p28的抗體可有效緩解疾病的進(jìn)程。另外在Thl相關(guān)性肉芽腫性疾病 (結(jié)核 、肉樣瘤病和克隆病)中表達(dá)量增， WSX-1-／- 小鼠在感染結(jié)核晚期可產(chǎn)生大量促炎細(xì)胞因子引起廣泛的炎癥反應(yīng)而加速死亡，而給予 IL-27能夠有效抑制炎癥的進(jìn)展， WSX-1-／- 小鼠膜型腎小球腎炎的發(fā)生率顯著降低。上述這些資料提示，IL-27參與這些疾病的發(fā)病過程 ，阻斷其作用可以起到治療作用【1】。IL-27可以調(diào)節(jié)T細(xì)胞的增殖分化,發(fā)揮促進(jìn)炎癥反應(yīng)和抗炎癥反應(yīng)的雙重作用。在多個(gè)自身免疫性疾病模型中發(fā)現(xiàn),IL-27能夠通過抑制Th17細(xì)胞的分化來抑制炎癥發(fā)展?，F(xiàn)不斷有研究發(fā)現(xiàn)Th17細(xì)胞參與了系統(tǒng)性紅斑狼瘡(sys-temic lupus erythematosus,SLE)的發(fā)病,因此,IL-27在SLE的發(fā)病中也可能發(fā)揮一定作用。另外注射IL-27單抗或者放大IL-27的信號(hào)能夠抑制自身免疫性糖尿病和狼瘡小鼠的疾病發(fā)展,提示IL-27可能與SLE的治療相關(guān)【2】。原發(fā)性干燥綜合征患者外周血單個(gè)核細(xì)胞中IL-27/P28及IL-27/EBl3mRNA相對(duì)表達(dá)量及其血漿IL-27濃度均顯著低于健康對(duì)照組;原發(fā)性干燥綜合征患者血漿IL-27濃度與抗SSA抗體,抗SSB抗體及IgE水平存在一定相關(guān)性.結(jié)論IL-27在原發(fā)性干燥綜合征患者外周血中表達(dá)降低,且與原發(fā)性干燥綜合征的發(fā)生發(fā)展存在一定的相關(guān)性,其可能參與了原發(fā)性干燥綜合征的發(fā)病過程【3】。

IL-27在抗腫瘤免疫反應(yīng)中的作用

由于IL-27在Thl型免疫反應(yīng)中的作用，推測(cè)IL-27在抗腫瘤免疫中也發(fā)揮重要作用。Hisada和Shinozaki分別將轉(zhuǎn)染 IL-27基因的小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞 C26、神經(jīng)母細(xì)胞瘤 TBJ移植小鼠體內(nèi)，發(fā)現(xiàn)腫瘤的生長(zhǎng)均受到明顯抑制 ，IL-27能夠促進(jìn)小鼠 CD4+T細(xì)胞的活化和特異性CTL活性增強(qiáng)等Thl型免疫反應(yīng) ，產(chǎn)生 IFN-γ 介導(dǎo)的抗原特異性抗腫瘤免疫，并通過活化記憶性 T細(xì)胞發(fā)揮免疫記憶的效應(yīng)對(duì)同種移植瘤的再次接種產(chǎn)生免疫識(shí)別而清除。Motom等對(duì)低免疫原性的小鼠黑色素瘤細(xì)胞 B16F10的研究發(fā) 現(xiàn)，IL-27不僅通過活化免疫系統(tǒng)發(fā)揮抗腫瘤作用還有直接的抗血管生成作用，能夠 以 IFN-γ依賴和非依賴的形式作用于內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生抗腫瘤趨化因子 IP-l0和 MIG而抑制新生血管生成，這個(gè)作用是通過 STAT1途徑完成的。Liu等將人食管癌細(xì)胞Ecal09細(xì)胞移植裸鼠體內(nèi)研究表明，IL-27能夠活化NK細(xì)胞，通過產(chǎn)生IFN-γ、TNF-a等炎癥性細(xì)胞因子和促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡的作用發(fā)揮抗腫瘤活性。在此過程中，炎癥性細(xì)胞因子高表達(dá)只在腫瘤移植的早期觀察到，這與 IL-27在炎癥反應(yīng)中的兩面性相一致。但還沒有關(guān)于內(nèi)源性 IL-27在腫瘤監(jiān)視和控制中作用的研究報(bào)道。在用人外周血CD4+T細(xì)胞和單核細(xì)胞起源的巨噬細(xì)胞對(duì) HIV感染的研究中，DNA微點(diǎn)陣分析結(jié)果顯示 IL-27可以誘導(dǎo)單核細(xì)胞起源的巨噬細(xì)胞產(chǎn)生各種干擾素誘導(dǎo)基因(IFIG)從而產(chǎn)生抗 HIV作用，其作用機(jī)制與IFN-a作用相似，IL-27能夠抑制HIV病毒復(fù)制但不能促進(jìn)干擾素分泌【1】。胃癌患者血清IL-27表達(dá)升高,可能與胃癌發(fā)生和進(jìn)展有關(guān)。2.聯(lián)合PGR和HP檢測(cè),血清IL-27對(duì)胃癌臨床早期篩查有一定的提示作用【5】。

動(dòng)物簡(jiǎn)介

營(yíng)養(yǎng)成分

生物學(xué)特性

遺傳信息

實(shí)驗(yàn)儀器

測(cè)試流程

注意事項(xiàng)

1.具體的試驗(yàn)周期以工程師告知的為準(zhǔn)。

2.文章中的圖片或者標(biāo)準(zhǔn)以及具體的試驗(yàn)方案僅供參考，因?yàn)槊總€(gè)樣品和項(xiàng)目都有所不同，所以最終以工程師告知的為準(zhǔn)。

3.關(guān)于（樣品量）的需求，最好是先咨詢我們的工程師確定，避免不必要的樣品損失。

4.加急試驗(yàn)周期一般是五個(gè)工作日左右，部分樣品有所差異

5.如果對(duì)于（B6-IL27tm1小鼠,動(dòng)物試驗(yàn)）還有什么疑問，可以咨詢我們的工程師為您一一解答。