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注意：因業(yè)務(wù)調(diào)整，暫不接受個(gè)人委托測(cè)試望見諒。

基本信息

品系名稱：B6-Ncr1^tm1小鼠

英文名稱：B6-Ncr1^tm1 mouse

疾病名稱：傳染性疾病、腫瘤

相關(guān)基因：NKp46

背景品系：C57BL/6J

遺傳類型：基因敲除

繁殖方式：HOM X HOM

繁殖代數(shù)：NA

研究用途：傳染性疾病、腫瘤等及信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)方面的研究。

飼養(yǎng)環(huán)境：屏障或隔離環(huán)境

培育單位：北京華阜康生物科技股份有限公司、中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究所

保種單位：中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究所

資源鑒定：否

鑒定日期：暫無(wú)介紹

特征描述

自然殺傷細(xì)胞（natural killer cells，NK 細(xì)胞）簡(jiǎn)介 NK細(xì)胞來(lái)源于骨髓的淋巴細(xì)胞，是機(jī)體抵抗病毒感染和防止腫瘤發(fā)生的第一道防線，與T細(xì)胞不同，NK 細(xì)胞無(wú)需抗原的刺激即可殺傷靶細(xì)胞。NK 細(xì)胞表面活化性受體和抑制性受體的平衡調(diào)控NK 細(xì)胞的活性。NK細(xì)胞表面受體包含在免疫球蛋白超家族 （immunoglobin gene superfamily，IgSF） 或細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞受體 （cytotoxic T lymphocytes receptor，CTLR）兩個(gè)超家族中。NK 細(xì)胞表面的活化受體分為人類白細(xì)胞抗原Ⅰ（human leukocyte antigen-I，HLA-1）類分子相關(guān)受體和非相關(guān)受體，前者包括殺傷細(xì)胞免疫球蛋白樣受體二區(qū)域（killer cell immunoglobulin-like receptor，2 domains short，KIR2DS），殺傷細(xì)胞免疫球蛋白樣受體三區(qū)域（killer cell immunoglobulin-like receptor，3 domains short，KIR3DS）及 NK 細(xì)胞受體 2C（natural killer cell group 2C，CD94/NKG2C）；后者主要有 NK 細(xì)胞受體 2區(qū)域（natural killer cell group 2D，NKG2D）和自然細(xì)胞毒性受體（natural cytotoxicity receptors，NCR；包括 NKp46、NKp30、NKp44）及 DNAX 輔助分子1 （DNAX accessory molecule-1，DNAM-1）；而相應(yīng)的抑制性受體為 KIR2DL、KIR3DL 及CD94/NKG2A 等。 近來(lái)的研究發(fā)現(xiàn)病毒感染細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞表面表達(dá)NK 細(xì)胞活化性受體的配體，NK細(xì)胞的“self-toleranee”理論認(rèn)為，病毒感染或腫瘤細(xì)胞由于失去了 NK 細(xì)胞抑制性受體的配體或過(guò)量產(chǎn)生活化性受體的配體，而被NK 細(xì)胞識(shí)別并殺傷，在正常細(xì)胞表面二者的配體達(dá)到平衡，因此免受殺傷。  NKp46 受體，屬于NK 細(xì)胞表面的HLA-1類分子非相關(guān)活化受體，因其特異表達(dá)于NK 細(xì)胞表面，分子量大小為 46kD，故命名為 NKp46 。 屬 IgSF 的新成員，缺乏N端連接糖，與KIR類似，基因位于19號(hào)染色體，為Ⅰ型跨膜糖蛋白，胞外區(qū)有C2型 Ig 樣區(qū)，即 D1和 D2（膜近中區(qū)域）是腫瘤及病毒感染細(xì)胞配體結(jié)合的區(qū)域（圖１）。

跨膜區(qū)有一個(gè)帶陽(yáng)性電荷的精氨酸殘基和一個(gè)缺乏基于免疫受體酪氨酸活化序列的細(xì)胞質(zhì)尾部，可以與 CD3ζ和 FcεRIγ穿膜區(qū)天冬氨酸殘基建立鹽橋，后者通過(guò)受體結(jié)合使得酪氨酸磷酸化故而介導(dǎo) NKp46的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。NKp46在抵御腫瘤、感染及其他相關(guān)方面的作用 NKp46在抗腫瘤中的作用 活化的NK細(xì)胞具有較強(qiáng)的殺傷腫瘤細(xì)胞作用，而 NKp46受體是傳遞活化刺激所必需的。已經(jīng)知道 NKp46的表達(dá)減少涉及宮頸癌及其前驅(qū)病損的免疫逃逸， NKp46／NCR1 表達(dá)缺失，增加淋巴瘤的生長(zhǎng)，而抗 NKp46的單克隆抗體能封閉 NK細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞的溶解作用。 宮頸癌 NKp46下調(diào)被認(rèn)為與 HPV的感染直接相關(guān)，HPV感染可能影響樹突狀細(xì)胞的遷移和功能，減少 IFNα、β及 IL-12的分泌從而影響NK細(xì)胞的活化。Yasser等證實(shí) NKp46對(duì)所有MM細(xì)胞株的殺傷都是必須的。 Cagnano等通過(guò) NKp46-Ｆc 段片的染色來(lái)檢測(cè)不同類型的原發(fā)人類黑色素細(xì)胞及黑色素病損中 NKp46配體的表達(dá)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)皮內(nèi)痣為陰性，交界痣黑色素病損（噬黑素細(xì)胞）中為陽(yáng)性， NKp46 配體的表達(dá)量與病損的惡變定向相關(guān)，提示 NKp46 配體可作為色素痣惡變的早期檢測(cè)指標(biāo)。 此外，NKp46在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中小膠質(zhì)細(xì)胞的清除也有著重要的作用，Lünemann等證實(shí)，大腦內(nèi)浸潤(rùn)的 NK細(xì)胞通過(guò) NKp46、NKG2D的介導(dǎo)識(shí)別，使活化的NK細(xì)胞與小膠質(zhì)細(xì)胞形成突觸連接，后者的穿孔素極化至細(xì)胞界面而發(fā)揮殺傷作用，且封閉了 NKp46及NKG2D 或上調(diào)主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類（major histocompatibility compatibility complexⅠ，MHC-1）分子的表達(dá)均可使小膠質(zhì)細(xì)胞免受殺傷，說(shuō)明 NKp46可以限制先天及獲得性免疫應(yīng)答。

Carrega等發(fā)現(xiàn)多種NK活化受體與殺傷相關(guān)，其中DNAM-１和NKp46是與殺傷關(guān)系最密切的受體，鑒于自身 HLA-Ⅰ類分子在NK細(xì)胞介導(dǎo)的攻擊中表現(xiàn)為一種保護(hù)性的作用，后通過(guò)比較黑色素瘤細(xì)胞及自身淋巴細(xì)胞的 HLA-Ⅰ類分子的表達(dá)發(fā)現(xiàn)約50％的檢測(cè)患者黑色素瘤細(xì)胞等位基因特異性表達(dá)缺失，揭示了盡管黑色素瘤細(xì)胞表面表達(dá)特異性 HLA-Ⅰ類分子但不足以對(duì)抗 NK細(xì)胞的細(xì)胞毒性。不表達(dá)特異性自身 HLA-Ⅰ類分子的抑制性受體的 NK細(xì)胞具有以一種獨(dú)立的機(jī)制有效殺傷自身黑色素瘤的能力。 而 Ogbomo等研究證實(shí)被缺乏非結(jié)構(gòu)基因1的流感A病毒IAV（influenza Avirus lacking the non-structural gene 1，DeltaNS1 IAV）感染的腫瘤細(xì)胞通過(guò)NK細(xì)胞胞外信號(hào)的調(diào)控增加活化酶磷酸化及顆粒釋放，顆粒的釋放多少特異性地被 NKp46調(diào)控， DeltaNS1 IAV 感染的腫瘤細(xì)胞致敏的 NK細(xì)胞克服由于DU145細(xì)胞表達(dá) MHC-Ⅰ分子帶來(lái)的抑制效應(yīng)從而對(duì)其殺傷。 這些發(fā)現(xiàn)表明通過(guò) DeltaNS1 IAV 致敏NK細(xì)胞可以增加其溶細(xì)胞活性，從而影響抗腫瘤免疫應(yīng)答【1】。有報(bào)道指出新發(fā)急性白血病患兒外周血NK細(xì)胞表面受體NKp46、NKG2D、KIR2DL1表達(dá)率均低于正常對(duì)照組。急性白血病患兒NK細(xì)胞表面NKp46、NKG2D表達(dá)率于完全緩解6-9月即恢復(fù)至基本正常,KIR2DL1表達(dá)率于完全緩解后6-18月低于初診治療前,24個(gè)月后升高,但仍未恢復(fù)至正常水平。急性白血病患兒NK細(xì)胞活性低于正常。急性淋巴細(xì)胞性白血病完全緩解后,患兒NK細(xì)胞殺傷活性與NK細(xì)胞數(shù)量呈正相關(guān),與NK細(xì)胞表面NKp46、KIR2DL1表達(dá)率呈正相關(guān),而與NKG2D表達(dá)率無(wú)相關(guān)性【2】。有研究參芪扶正注射液能抑制人肺癌LEWIS細(xì)胞增殖,促進(jìn)其凋亡;其機(jī)制與參芪扶正注射液可促進(jìn)肺癌LEWIS細(xì)胞NCR1、NKp46 mRNA與蛋白高表達(dá),進(jìn)而介導(dǎo)NK細(xì)胞殺傷肺癌細(xì)胞有關(guān)【3】。有人研究芪術(shù)抗癌方可以增加肝癌NKp46的表達(dá),激活NK細(xì)胞,提高NK細(xì)胞的細(xì)胞毒作用【4】。 NKp46在抵御感染中的作用 NKp46不僅在腫瘤的殺傷中有著舉足輕重的作用，也充當(dāng)了早期抵御病毒感染的第一道防線。 研究發(fā)現(xiàn)NK 細(xì)胞通過(guò) NKp46識(shí)別病毒血凝素（hemagglutinin，HA），并與其發(fā)生凝集，而殺傷流感病毒感染的細(xì)胞。此外， NKp46 也參與NK細(xì)胞介導(dǎo)的胞內(nèi)菌（如結(jié)核分枝桿菌）感染的細(xì)胞毒作用，通過(guò)檢測(cè)來(lái)自健康 T細(xì)胞依賴性陽(yáng)性結(jié)核菌素皮膚試驗(yàn)（TST）陽(yáng)性或陰性志愿者，分離其中表達(dá) NKp46的NK細(xì)胞，能夠有效溶解結(jié)核菌感染的單核細(xì)胞【1】。慢性乙肝患者外周血NK細(xì)胞頻率下降,NKp46和NKG2A表達(dá)上調(diào),這些改變與免疫清除病毒有關(guān)【5】。 其他 盡管 NKp46促進(jìn)NK細(xì)胞的活化和殺傷能力，但在早期妊娠時(shí)子宮內(nèi)的情況則恰好相反，早期妊娠時(shí)子宮蛻膜內(nèi) NK 細(xì)胞豐富，且表達(dá)所有外周血 ＮＫ 細(xì)胞表面受體，但其細(xì)胞毒性卻很低，只是其內(nèi)容物有粒細(xì)胞毒性，與外周血NK細(xì)胞的效應(yīng)功能形成了對(duì)照。 實(shí)驗(yàn)表明 NKp46 介導(dǎo)的細(xì)胞毒性被CD2 激活但被NKG2A 阻斷， NKp46 與 NKG2D 共表達(dá)于dNK表面，當(dāng)加入了 NKp46的單克隆抗體后，NK細(xì)胞內(nèi)的鈣動(dòng)員被誘導(dǎo)，穿孔素極化，并最后通過(guò)胞吐作用溶解效應(yīng)靶細(xì)胞。 Domaica等研究T細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞相互作用的早期事件，觀察到在與一些黑色素瘤細(xì)胞共同培養(yǎng)時(shí)活化的CD4 +T細(xì)胞促進(jìn)了NK細(xì)胞脫顆粒及依賴 NKG2D-， NKp46干擾素的分泌，其通過(guò)一種尚未闡明的機(jī)制支持NK細(xì)胞的功能，可能由于CD4+ T細(xì)胞捕獲了腫瘤表面NKG2D、 NKp46 配體。 NKp46與配體結(jié)合的機(jī)制 已有研究證實(shí)， NKp46主要是通過(guò)其表面表達(dá)的 α2、6 終末唾液酸與病毒 IV-HA、H-N(SV)相凝集，而與腫瘤表面配體結(jié)合的則為膜近中區(qū)域即 NKp46D2，但表達(dá)在腫瘤細(xì)胞表面的并能被 NKp46 所識(shí)別的細(xì)胞性配體尚未明確。 多糖殘基——蘇氨酸225作為一種核心氨基酸在識(shí)別病毒HA及腫瘤配體的過(guò)程中是不可或缺的。 NKp46的作用機(jī)制 NKp46是最早發(fā)現(xiàn)的NCR，表達(dá)在靜息及活化的NK細(xì)胞表面，在多種腫瘤細(xì)胞的殺傷中起著舉足輕重的作用，其中部分殺傷依賴 NKp30介導(dǎo)。 主要機(jī)制是受體首先耦合在細(xì)胞質(zhì)內(nèi)，再通過(guò)基于免疫受體酪氨酸活化基序（ITAM）的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑發(fā)揮殺傷作用。 而2B4作為NCR的共刺激受體，可以影響 NKp46的功能，與 NKp46在細(xì)胞表面的密度直接相關(guān)。 作用機(jī)制見圖 ２【1】。

動(dòng)物簡(jiǎn)介

營(yíng)養(yǎng)成分

生物學(xué)特性

遺傳信息

實(shí)驗(yàn)儀器

測(cè)試流程

注意事項(xiàng)

1.具體的試驗(yàn)周期以工程師告知的為準(zhǔn)。

2.文章中的圖片或者標(biāo)準(zhǔn)以及具體的試驗(yàn)方案僅供參考，因?yàn)槊總€(gè)樣品和項(xiàng)目都有所不同，所以最終以工程師告知的為準(zhǔn)。

3.關(guān)于（樣品量）的需求，最好是先咨詢我們的工程師確定，避免不必要的樣品損失。

4.加急試驗(yàn)周期一般是五個(gè)工作日左右，部分樣品有所差異

5.如果對(duì)于（B6-Ncr1tm1小鼠,動(dòng)物試驗(yàn)）還有什么疑問(wèn)，可以咨詢我們的工程師為您一一解答。