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hp檢測方法及檢測標(biāo)準(zhǔn)

原創(chuàng)發(fā)布者:北檢院    發(fā)布時間:2025-04-27     點擊數(shù):

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幽門螺桿菌(HP)檢測方法與標(biāo)準(zhǔn)詳解

幽門螺桿菌(Helicobacter pylori,HP)是引發(fā)胃炎、胃潰瘍及胃癌的重要致病菌之一。準(zhǔn)確檢測HP感染對臨床診斷和治療具有重要意義。本文針對HP檢測的樣品類型、檢測項目、方法原理及儀器設(shè)備進(jìn)行系統(tǒng)介紹。

檢測樣品

HP檢測的常見樣品類型包括:

  • 胃黏膜組織:通過胃鏡活檢獲取,適用于組織學(xué)檢測或快速尿素酶試驗。
  • 血液:用于檢測血清中HP特異性抗體(IgG/IgA)。
  • 糞便:用于檢測糞便HP抗原。
  • 呼氣樣本:通過尿素呼氣試驗(UBT)檢測代謝活性。

檢測項目

HP檢測的核心項目涵蓋以下類別:

  1. 細(xì)菌培養(yǎng)與鑒定:直接分離培養(yǎng)HP并鑒定菌株特性。
  2. 抗原檢測:檢測糞便或胃黏膜中的HP抗原。
  3. 抗體檢測:分析血液中HP抗體的存在及濃度。
  4. 分子生物學(xué)檢測:通過DNA擴(kuò)增技術(shù)(如PCR)檢測HP基因片段。
  5. 尿素酶活性檢測:評估HP的尿素分解能力。

檢測方法

1. 快速尿素酶試驗(RUT)

原理:利用HP分泌的尿素酶分解尿素產(chǎn)生氨和二氧化碳,導(dǎo)致試劑pH值升高并顯色。 步驟:將胃黏膜組織置于含尿素和酚紅的試劑中,觀察顏色變化(黃色→紅色為陽性)。

2. 血清學(xué)檢測(ELISA)

原理:通過酶聯(lián)免疫吸附法檢測血清中HP抗體。 步驟:將血清樣本加入預(yù)包被HP抗原的微孔板,加入酶標(biāo)記二抗后顯色,通過吸光度值判定結(jié)果。

3. 糞便抗原檢測(SAT)

原理:采用單克隆抗體技術(shù)檢測糞便中的HP抗原。 步驟:將糞便樣本處理后與檢測試紙條反應(yīng),通過雙抗體夾心法顯示結(jié)果(條帶顯色為陽性)。

4. 尿素呼氣試驗(UBT)

原理:口服含¹³C或¹?C標(biāo)記的尿素后,檢測呼氣中標(biāo)記的CO?濃度。 步驟:空腹服用尿素試劑,采集服藥前后呼氣樣本,通過質(zhì)譜儀或閃爍計數(shù)器分析CO?同位素含量。

5. 分子生物學(xué)檢測(PCR)

原理:擴(kuò)增HP特異性基因(如ureA、glmM)以確認(rèn)感染。 步驟:提取樣本DNA,設(shè)計特異性引物進(jìn)行擴(kuò)增,通過電泳或熒光探針分析產(chǎn)物。

檢測儀器

  • PCR儀:用于基因擴(kuò)增,檢測HP的DNA片段。
  • 酶標(biāo)儀:配合ELISA法測定血清抗體的吸光度值。
  • 質(zhì)譜儀:定量分析尿素呼氣試驗中的¹³CO?濃度。
  • 免疫層析分析儀:自動化判讀糞便抗原試紙條結(jié)果。
  • 組織切片染色系統(tǒng):輔助顯微鏡觀察胃黏膜中的HP形態(tài)。

檢測標(biāo)準(zhǔn)

HP檢測需遵循國內(nèi)外權(quán)威指南,包括:

  • 陽性判定:RUT顯色陽性、UBT同位素值高于閾值(如¹³C-UBT DOB值≥4‰)、PCR擴(kuò)增出目標(biāo)基因等。
  • 陰性判定:多項檢測結(jié)果一致陰性,或治療后復(fù)查確認(rèn)。
  • 質(zhì)量控制:實驗需設(shè)置陽性/陰性對照,定期校準(zhǔn)儀器并參與室間質(zhì)評。

結(jié)語

HP檢測方法多樣,需結(jié)合臨床需求、樣本類型及設(shè)備條件選擇合適方案。細(xì)菌培養(yǎng)和分子檢測適用于科研及耐藥分析,而尿素呼氣試驗和糞便抗原則更適用于大規(guī)模篩查。通過標(biāo)準(zhǔn)化操作與結(jié)果解讀,可顯著提升HP感染的診斷準(zhǔn)確性,為患者提供精準(zhǔn)治療依據(jù)。


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