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FISH檢測(cè)呈陽(yáng)性檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)

原創(chuàng)發(fā)布者:北檢院    發(fā)布時(shí)間:2025-04-26     點(diǎn)擊數(shù):

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標(biāo)題:FISH檢測(cè)陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)解讀:樣品、方法與儀器全解析

引言 熒光原位雜交(FISH)技術(shù)是一種基于DNA探針的高靈敏度分子檢測(cè)方法,廣泛應(yīng)用于腫瘤診斷、遺傳病篩查及病原微生物檢測(cè)等領(lǐng)域。本文將從檢測(cè)樣品、項(xiàng)目、方法及儀器四個(gè)維度,系統(tǒng)解析FISH檢測(cè)的陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)。

一、檢測(cè)樣品類型

FISH檢測(cè)的適用樣品包括:

  1. 組織切片:如腫瘤組織(乳腺癌、肺癌等)的石蠟包埋切片。
  2. 細(xì)胞樣本:如外周血淋巴細(xì)胞、骨髓穿刺液或脫落細(xì)胞(如尿液、胸腹水)。
  3. 微生物樣本:如細(xì)菌、真菌的DNA樣本。 樣品需滿足完整性要求,例如組織切片厚度需為4-5微米,細(xì)胞樣本需保證細(xì)胞核結(jié)構(gòu)清晰。

二、檢測(cè)項(xiàng)目與臨床意義

FISH技術(shù)主要用于以下基因異常的檢測(cè):

  • HER2基因擴(kuò)增:指導(dǎo)乳腺癌靶向治療。
  • ALK基因重排:非小細(xì)胞肺癌的分子分型依據(jù)。
  • 染色體數(shù)目異常:如唐氏綜合征(21號(hào)染色體三體)。 陽(yáng)性結(jié)果需結(jié)合臨床背景,例如HER2基因信號(hào)計(jì)數(shù)≥6.0/細(xì)胞或HER2/CEP17比值≥2.0時(shí)判定為擴(kuò)增陽(yáng)性。

三、檢測(cè)方法流程

FISH檢測(cè)遵循標(biāo)準(zhǔn)化操作流程:

  1. 樣品預(yù)處理:脫蠟、蛋白酶消化以暴露DNA。
  2. 探針雜交:將熒光標(biāo)記的DNA探針與靶序列結(jié)合,37℃孵育12-16小時(shí)。
  3. 洗脫與封片:去除未結(jié)合的探針,DAPI復(fù)染后加蓋玻片。
  4. 結(jié)果判讀:通過(guò)熒光顯微鏡觀察信號(hào)點(diǎn),計(jì)數(shù)至少20個(gè)細(xì)胞并計(jì)算均值。

四、核心儀器與質(zhì)量控制

FISH檢測(cè)依賴高精度儀器支持:

  • 熒光顯微鏡:配備特定濾光片(如DAPI、FITC、Texas Red),推薦型號(hào)如奧林巴斯BX63。
  • 圖像分析系統(tǒng):如MetaSystems平臺(tái),用于自動(dòng)計(jì)數(shù)與信號(hào)強(qiáng)度分析。 實(shí)驗(yàn)需設(shè)置內(nèi)對(duì)照(如CEP17探針)及陰性/陽(yáng)性對(duì)照樣本,確保結(jié)果可靠性。

結(jié)語(yǔ) FISH檢測(cè)的陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)需綜合信號(hào)強(qiáng)度、細(xì)胞比例及臨床指征進(jìn)行判斷。規(guī)范的樣品處理、嚴(yán)格的質(zhì)控流程及專業(yè)儀器是保障結(jié)果準(zhǔn)確的核心。隨著技術(shù)發(fā)展,F(xiàn)ISH在精準(zhǔn)醫(yī)療中的應(yīng)用將持續(xù)深化。

聲明:本文內(nèi)容僅供學(xué)術(shù)參考,具體檢測(cè)需由專業(yè)機(jī)構(gòu)完成。


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實(shí)驗(yàn)儀器

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測(cè)試流程

FISH檢測(cè)呈陽(yáng)性檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)流程

注意事項(xiàng)

1.具體的試驗(yàn)周期以工程師告知的為準(zhǔn)。

2.文章中的圖片或者標(biāo)準(zhǔn)以及具體的試驗(yàn)方案僅供參考,因?yàn)槊總€(gè)樣品和項(xiàng)目都有所不同,所以最終以工程師告知的為準(zhǔn)。

3.關(guān)于(樣品量)的需求,最好是先咨詢我們的工程師確定,避免不必要的樣品損失。

4.加急試驗(yàn)周期一般是五個(gè)工作日左右,部分樣品有所差異

5.如果對(duì)于(FISH檢測(cè)呈陽(yáng)性檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn))還有什么疑問(wèn),可以咨詢我們的工程師為您一一解答。

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