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核酸檢測(cè)檢查要求檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)

原創(chuàng)發(fā)布者:北檢院    發(fā)布時(shí)間:2025-04-26     點(diǎn)擊數(shù):

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核酸檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)流程與技術(shù)要求解析

為保障核酸檢測(cè)的準(zhǔn)確性與可靠性,實(shí)驗(yàn)室需嚴(yán)格遵循標(biāo)準(zhǔn)化操作流程。本文將詳細(xì)介紹核酸檢測(cè)的關(guān)鍵要素,包括檢測(cè)樣品、檢測(cè)項(xiàng)目、檢測(cè)方法及儀器設(shè)備,為相關(guān)從業(yè)人員提供參考。

一、檢測(cè)樣品

核酸檢測(cè)的主要樣品類型包括:

  1. 上呼吸道樣本:咽拭子、鼻拭子為最常用樣本,適用于新冠病毒、流感病毒等呼吸道病原體檢測(cè)。
  2. 下呼吸道樣本:如痰液、肺泡灌洗液,常用于重癥患者或特殊病原體篩查。
  3. 血液樣本:用于HIV、乙肝病毒等血液傳播病原體的核酸檢測(cè)。
  4. 環(huán)境樣本:如物體表面涂抹樣本,用于公共場(chǎng)所的病毒污染監(jiān)測(cè)。

樣本采集后需在2~8℃條件下保存,并于24小時(shí)內(nèi)送檢;若需長(zhǎng)期儲(chǔ)存,應(yīng)置于-70℃以下超低溫環(huán)境。

二、檢測(cè)項(xiàng)目

核酸檢測(cè)的核心目標(biāo)是檢測(cè)病原體特異性核酸序列,常見(jiàn)項(xiàng)目包括:

  1. 新型冠狀病毒(SARS-CoV-2):靶向ORF1ab基因、N基因等保守區(qū)域。
  2. 流感病毒:區(qū)分甲型、乙型流感及亞型(如H1N1)。
  3. 肝炎病毒:如HBV-DNA、HCV-RNA定量檢測(cè)。
  4. 性傳播疾病病原體:包括HIV、HPV、淋球菌等。

三、檢測(cè)方法

目前主流核酸檢測(cè)方法為實(shí)時(shí)熒光定量PCR(RT-qPCR),具體流程如下:

  1. 核酸提取:使用磁珠法或離心柱法從樣本中分離純化RNA/DNA。
  2. 反轉(zhuǎn)錄(針對(duì)RNA病毒):將RNA逆轉(zhuǎn)錄為cDNA。
  3. 擴(kuò)增與檢測(cè):通過(guò)熒光探針標(biāo)記靶基因,實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)擴(kuò)增信號(hào),判定結(jié)果。

此外,部分實(shí)驗(yàn)室采用等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)(如LAMP),可在恒溫條件下快速完成核酸擴(kuò)增,適用于現(xiàn)場(chǎng)篩查。

四、檢測(cè)儀器

核酸檢測(cè)需依賴高精度儀器設(shè)備,主要包括:

  1. PCR擴(kuò)增儀:支持多通道熒光檢測(cè),如ABI 7500、Bio-Rad CFX96等。
  2. 核酸提取儀:實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化提取,提高效率與一致性(例:Qiagen QIAcube)。
  3. 高速離心機(jī):用于樣本預(yù)處理與試劑混合。
  4. 生物安全柜:確保操作過(guò)程符合生物安全二級(jí)(BSL-2)標(biāo)準(zhǔn)。
  5. 超低溫冰箱:用于試劑與樣本的長(zhǎng)期保存。

注意事項(xiàng)

檢測(cè)過(guò)程中需嚴(yán)格質(zhì)量控制,包括:

  • 每批次實(shí)驗(yàn)設(shè)置陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照及內(nèi)參基因。
  • 定期校準(zhǔn)儀器,確保擴(kuò)增效率在90%~110%之間。
  • 實(shí)驗(yàn)人員需通過(guò)專業(yè)培訓(xùn)并取得PCR上崗證。

以上流程符合《醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室管理辦法》及《新型冠狀病毒肺炎防控方案》要求,為核酸檢測(cè)結(jié)果的可信度提供技術(shù)保障。


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實(shí)驗(yàn)儀器

實(shí)驗(yàn)室儀器 實(shí)驗(yàn)室儀器 實(shí)驗(yàn)室儀器 實(shí)驗(yàn)室儀器

測(cè)試流程

核酸檢測(cè)檢查要求檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)流程

注意事項(xiàng)

1.具體的試驗(yàn)周期以工程師告知的為準(zhǔn)。

2.文章中的圖片或者標(biāo)準(zhǔn)以及具體的試驗(yàn)方案僅供參考,因?yàn)槊總€(gè)樣品和項(xiàng)目都有所不同,所以最終以工程師告知的為準(zhǔn)。

3.關(guān)于(樣品量)的需求,最好是先咨詢我們的工程師確定,避免不必要的樣品損失。

4.加急試驗(yàn)周期一般是五個(gè)工作日左右,部分樣品有所差異

5.如果對(duì)于(核酸檢測(cè)檢查要求檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn))還有什么疑問(wèn),可以咨詢我們的工程師為您一一解答。

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