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檢測(cè)自噬的檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)

原創(chuàng)發(fā)布者:北檢院    發(fā)布時(shí)間:2025-05-11     點(diǎn)擊數(shù):

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注意:因業(yè)務(wù)調(diào)整,暫不接受個(gè)人委托測(cè)試望見諒。

信息概要

自噬檢測(cè)是評(píng)估細(xì)胞內(nèi)自噬活動(dòng)水平的關(guān)鍵技術(shù),用于研究細(xì)胞代謝、疾病機(jī)制及藥物開發(fā)等領(lǐng)域。該檢測(cè)通過分析自噬相關(guān)標(biāo)志物、結(jié)構(gòu)變化及功能狀態(tài),為科研和臨床提供重要數(shù)據(jù)支持。檢測(cè)自噬的標(biāo)準(zhǔn)化流程可確保結(jié)果的可重復(fù)性和準(zhǔn)確性,對(duì)理解細(xì)胞穩(wěn)態(tài)、癌癥、神經(jīng)退行性疾病等具有重要意義。

檢測(cè)項(xiàng)目

LC3-I/LC3-II蛋白比值,p62/SQSTM1蛋白降解水平,自噬小體數(shù)量,自噬流速率,溶酶體活性,ATG蛋白表達(dá)量,Beclin-1相互作用分析,自噬相關(guān)基因表達(dá)(如ATG5、ATG7),線粒體自噬(Mitophagy)標(biāo)志物,ER-phagy標(biāo)志物,自噬抑制劑/誘導(dǎo)劑效應(yīng)驗(yàn)證,透射電鏡觀察自噬結(jié)構(gòu),熒光標(biāo)記LC3點(diǎn)狀聚集,細(xì)胞存活率與自噬關(guān)聯(lián)性,自噬溶酶體融合效率,ROS水平與自噬關(guān)系,mTOR信號(hào)通路活性,ULK1磷酸化狀態(tài),細(xì)胞能量代謝指標(biāo)(ATP/AMP比值),自噬相關(guān)microRNA表達(dá)譜。

檢測(cè)范圍

哺乳動(dòng)物細(xì)胞系(如HeLa、HEK293),原代細(xì)胞(肝細(xì)胞、神經(jīng)元),腫瘤組織樣本,轉(zhuǎn)基因動(dòng)物模型(小鼠、斑馬魚),臨床活檢組織,類器官模型,植物細(xì)胞樣本,酵母模型,血液樣本(外周血單核細(xì)胞),腦脊液細(xì)胞,干細(xì)胞分化模型,藥物篩選模型,病原體感染細(xì)胞模型,衰老細(xì)胞模型,免疫細(xì)胞(T細(xì)胞、巨噬細(xì)胞),腦組織切片,腸道微生物共培養(yǎng)系統(tǒng),3D細(xì)胞培養(yǎng)模型,線粒體分離樣本,外泌體與自噬關(guān)聯(lián)分析。

檢測(cè)方法

Western Blot:通過LC3-II/I比值及p62蛋白定量分析自噬流。

透射電子顯微鏡(TEM):直接觀察自噬小體及溶酶體超微結(jié)構(gòu)。

熒光顯微鏡成像:利用GFP-LC3轉(zhuǎn)染細(xì)胞檢測(cè)自噬小體形成。

流式細(xì)胞術(shù):定量分析LC3陽性細(xì)胞比例及溶酶體pH值。

qRT-PCR:檢測(cè)自噬相關(guān)基因(ATG家族)的mRNA表達(dá)水平。

免疫組化(IHC):組織切片中定位自噬標(biāo)志物表達(dá)。

酶標(biāo)儀檢測(cè):基于LysoTracker探針的溶酶體活性分析。

細(xì)胞活力檢測(cè):CCK-8/MTT法評(píng)估自噬與細(xì)胞存活關(guān)聯(lián)性。

自噬報(bào)告基因系統(tǒng):使用mRFP-GFP-LC3雙熒光探針區(qū)分自噬流階段。

蛋白質(zhì)降解速率測(cè)定:放射性標(biāo)記追蹤長(zhǎng)壽命蛋白降解。

免疫熒光共定位:分析LC3與溶酶體標(biāo)記物(LAMP1)共定位程度。

ATP含量檢測(cè):通過生物發(fā)光法評(píng)估細(xì)胞能量狀態(tài)與自噬關(guān)系。

自噬小體計(jì)數(shù):圖像分析軟件定量熒光點(diǎn)狀結(jié)構(gòu)數(shù)量。

溶酶體酶活性檢測(cè):Cathepsin B/L活性比色法。

代謝組學(xué)分析:LC-MS檢測(cè)自噬相關(guān)代謝物變化。

檢測(cè)儀器

透射電子顯微鏡,熒光顯微鏡,流式細(xì)胞儀,酶標(biāo)儀,實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀,蛋白質(zhì)電泳系統(tǒng),化學(xué)發(fā)光成像儀,超速離心機(jī),細(xì)胞培養(yǎng)箱,激光共聚焦顯微鏡,顯微成像分析系統(tǒng),高效液相色譜儀(HPLC),質(zhì)譜儀(LC-MS),多功能酶標(biāo)儀,生物分析儀。

實(shí)驗(yàn)儀器

實(shí)驗(yàn)室儀器 實(shí)驗(yàn)室儀器 實(shí)驗(yàn)室儀器 實(shí)驗(yàn)室儀器

測(cè)試流程

檢測(cè)自噬的檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)流程

注意事項(xiàng)

1.具體的試驗(yàn)周期以工程師告知的為準(zhǔn)。

2.文章中的圖片或者標(biāo)準(zhǔn)以及具體的試驗(yàn)方案僅供參考,因?yàn)槊總€(gè)樣品和項(xiàng)目都有所不同,所以最終以工程師告知的為準(zhǔn)。

3.關(guān)于(樣品量)的需求,最好是先咨詢我們的工程師確定,避免不必要的樣品損失。

4.加急試驗(yàn)周期一般是五個(gè)工作日左右,部分樣品有所差異

5.如果對(duì)于(檢測(cè)自噬的檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn))還有什么疑問,可以咨詢我們的工程師為您一一解答。

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