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γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶測定試劑盒(GPNA底物法)檢測

原創(chuàng)發(fā)布者:北檢院    發(fā)布時間:2025-04-10     點(diǎn)擊數(shù):

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γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶(γ-GT)測定試劑盒(GPNA底物法)檢測說明

導(dǎo)語 γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶(γ-GT)是臨床診斷肝膽疾病的重要指標(biāo)之一。本文基于GPNA底物法,詳細(xì)說明γ-GT活性測定的實驗流程及相關(guān)信息,適用于醫(yī)學(xué)檢驗、科研及健康管理領(lǐng)域。

一、檢測樣品

本方法適用于人血清或血漿樣本的檢測。樣本采集后需在2小時內(nèi)離心分離(3000 rpm,10分鐘),避免溶血或脂血干擾。分離后的樣本在2~8℃條件下可保存48小時,長期保存需置于-20℃以下。

二、檢測項目

檢測項目為γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶(γ-GT)活性測定,通過檢測酶催化底物反應(yīng)的速率,間接反映樣本中γ-GT的活性水平。該指標(biāo)對肝膽系統(tǒng)疾?。ㄈ缒懼俜e、肝炎、肝硬化)及酒精性肝損傷的早期篩查和療效監(jiān)測具有重要意義。

三、檢測方法(GPNA底物法)

  1. 方法原理 以γ-谷氨酰對硝基苯胺(GPNA)為底物,在γ-GT的催化作用下,底物中的γ-谷氨?;D(zhuǎn)移至受體甘氨酰甘氨酸(Gly-Gly),生成對硝基苯胺(PNA)。PNA在405 nm波長處吸光度升高速率與γ-GT活性成正比,通過動力學(xué)法計算酶活性單位。

  2. 反應(yīng)體系

  • 試劑組成:含GPNA底物、Gly-Gly受體及緩沖液(pH 8.2~8.5)。
  • 反應(yīng)條件:37℃恒溫條件下,檢測主波長405 nm,副波長600 nm(用于消除脂血干擾)。

四、檢測儀器

  1. 適用設(shè)備
  • 全自動生化分析儀(如日立7180、羅氏Cobas系列)。
  • 半自動生化分析儀(需配合恒溫比色裝置)。
  1. 儀器參數(shù)設(shè)置
  • 溫度:37℃
  • 波長:主波長405 nm,副波長600 nm
  • 讀數(shù)時間:反應(yīng)啟動后60秒開始,連續(xù)監(jiān)測180秒。
  1. 校準(zhǔn)與質(zhì)控
  • 校準(zhǔn)品:使用配套γ-GT標(biāo)準(zhǔn)品建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。
  • 質(zhì)控品:每日檢測需包含高、低兩個水平的質(zhì)控樣本,偏差需<10%。

五、注意事項

  1. 試劑需避光保存(2~8℃),復(fù)溶后試劑在室溫下穩(wěn)定8小時。
  2. 樣本中膽紅素>342 μmol/L或甘油三酯>8.5 mmol/L時需稀釋后復(fù)測。
  3. 避免試劑與金屬離子接觸,以防干擾反應(yīng)。

結(jié)語 GPNA底物法具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、操作簡便等優(yōu)勢,可滿足臨床對γ-GT活性測定的精準(zhǔn)需求。通過標(biāo)準(zhǔn)化操作及儀器配合,能夠為肝膽疾病的診斷與治療提供可靠依據(jù)。

實驗儀器

實驗室儀器 實驗室儀器 實驗室儀器 實驗室儀器

測試流程

γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶測定試劑盒(GPNA底物法)檢測流程

注意事項

1.具體的試驗周期以工程師告知的為準(zhǔn)。

2.文章中的圖片或者標(biāo)準(zhǔn)以及具體的試驗方案僅供參考,因為每個樣品和項目都有所不同,所以最終以工程師告知的為準(zhǔn)。

3.關(guān)于(樣品量)的需求,最好是先咨詢我們的工程師確定,避免不必要的樣品損失。

4.加急試驗周期一般是五個工作日左右,部分樣品有所差異

5.如果對于(γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶測定試劑盒(GPNA底物法)檢測)還有什么疑問,可以咨詢我們的工程師為您一一解答。

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