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細胞代謝檢測

原創(chuàng)發(fā)布者:北檢院    發(fā)布時間:2025-04-09     點擊數(shù):

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細胞代謝檢測技術:方法與應用

細胞代謝是維持生命活動的基礎過程,其動態(tài)變化與疾病發(fā)生、藥物作用機制及細胞功能調(diào)控密切相關。通過精準檢測細胞代謝活性,可為生物醫(yī)學研究提供關鍵數(shù)據(jù)支持。以下是關于細胞代謝檢測的核心內(nèi)容。

一、檢測樣品

細胞代謝檢測的樣品類型主要包括:

  • 培養(yǎng)細胞:如腫瘤細胞、干細胞、原代細胞等;
  • 組織樣本:經(jīng)消化分離后的組織細胞懸液;
  • 微生物細胞:如細菌、真菌等;
  • 特定亞細胞結(jié)構:分離的線粒體或細胞質(zhì)組分。

樣品需在檢測前進行標準化處理,確保細胞活性和代謝狀態(tài)穩(wěn)定。

二、檢測項目

細胞代謝檢測涵蓋以下核心指標:

  1. 能量代謝相關參數(shù):包括糖酵解速率(ECAR)、線粒體呼吸速率(OCR)、ATP生成量等;
  2. 代謝物濃度:如葡萄糖、乳酸、谷氨酰胺、脂肪酸等;
  3. 酶活性分析:關鍵代謝酶(如己糖激酶、乳酸脫氫酶)的活性測定;
  4. 氧化應激指標:活性氧(ROS)水平、谷胱甘肽(GSH)含量等。

三、檢測方法

目前主流的細胞代謝檢測技術包括:

  1. Seahorse XF技術:通過實時監(jiān)測細胞外酸化率(ECAR)和耗氧率(OCR),評估糖酵解與線粒體呼吸功能;
  2. 代謝組學分析:采用質(zhì)譜(MS)或核磁共振(NMR)技術,全面解析細胞內(nèi)代謝物譜;
  3. 熒光探針法:利用特異性熒光染料(如JC-1、DCFH-DA)檢測線粒體膜電位或ROS水平;
  4. 生化試劑盒:通過比色法或熒光法測定ATP、乳酸等代謝產(chǎn)物濃度。

四、檢測儀器

完成上述檢測需依賴高精度儀器設備,主要包括:

  1. Seahorse XFe/XFp分析儀(安捷倫科技):專用于實時動態(tài)監(jiān)測活細胞代謝通量,支持多孔板高通量檢測;
  2. 液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀(LC-MS):如Thermo Fisher Q Exactive系列,適用于代謝組學定量分析;
  3. 多功能酶標儀(如BioTek Synergy H1):兼容熒光、吸光度、化學發(fā)光等多模式檢測;
  4. 活細胞成像系統(tǒng)(如Olympus IXplore):結(jié)合熒光探針實現(xiàn)代謝過程的時空動態(tài)觀察。

五、應用領域

細胞代謝檢測技術廣泛應用于:

  • 疾病機制研究:如癌癥代謝重編程、神經(jīng)退行性疾病中的能量失衡;
  • 藥物篩選與評價:評估藥物對細胞代謝通路的影響;
  • 免疫代謝研究:解析免疫細胞活化或衰竭的代謝特征;
  • 微生物工程:優(yōu)化工業(yè)菌種的代謝效率。

六、結(jié)論

細胞代謝檢測通過多維度參數(shù)分析,為揭示生命活動規(guī)律及疾病干預策略提供了重要工具。隨著高通量、高靈敏度技術的普及,代謝研究正朝著更精準、更動態(tài)的方向發(fā)展,助力基礎研究與轉(zhuǎn)化醫(yī)學的深度融合。

(本文內(nèi)容僅供參考,具體實驗方案需結(jié)合研究目標設計。)

實驗儀器

實驗室儀器 實驗室儀器 實驗室儀器 實驗室儀器

測試流程

細胞代謝檢測流程

注意事項

1.具體的試驗周期以工程師告知的為準。

2.文章中的圖片或者標準以及具體的試驗方案僅供參考,因為每個樣品和項目都有所不同,所以最終以工程師告知的為準。

3.關于(樣品量)的需求,最好是先咨詢我們的工程師確定,避免不必要的樣品損失。

4.加急試驗周期一般是五個工作日左右,部分樣品有所差異

5.如果對于(細胞代謝檢測)還有什么疑問,可以咨詢我們的工程師為您一一解答。

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