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組織流式檢測

原創(chuàng)發(fā)布者:北檢院    發(fā)布時間:2025-04-09     點擊數(shù):

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組織流式檢測技術(shù):精準(zhǔn)解析細(xì)胞特性的關(guān)鍵工具

檢測樣品

組織流式檢測技術(shù)適用于多種生物樣本,包括但不限于細(xì)胞懸液、組織切片、外周血樣本以及體外培養(yǎng)的細(xì)胞系。常見的檢測樣品類型涵蓋腫瘤組織、免疫細(xì)胞(如T細(xì)胞、B細(xì)胞、NK細(xì)胞)、干細(xì)胞及微生物感染樣本等。為確保檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性,樣品需經(jīng)過標(biāo)準(zhǔn)化處理,例如通過酶解或機(jī)械破碎法將組織分散為單細(xì)胞懸液,并去除碎片和雜質(zhì)。

檢測項目

組織流式檢測的核心目標(biāo)是對細(xì)胞進(jìn)行多參數(shù)定量分析,具體檢測項目包括:

  1. 免疫表型分析:通過標(biāo)記特異性抗體,識別細(xì)胞表面或胞內(nèi)蛋白(如CD分子、細(xì)胞因子受體),解析免疫細(xì)胞亞群分布及功能狀態(tài)。
  2. 細(xì)胞周期與增殖分析:利用DNA染料(如PI、DAPI)評估細(xì)胞周期各階段比例,研究藥物或基因?qū)?xì)胞增殖的影響。
  3. 細(xì)胞凋亡與活性檢測:通過Annexin V/PI雙染法或線粒體膜電位探針,區(qū)分活細(xì)胞、早期凋亡細(xì)胞及壞死細(xì)胞。
  4. 細(xì)胞因子與信號通路分析:檢測細(xì)胞內(nèi)磷酸化蛋白或分泌型因子,揭示信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路激活狀態(tài)。

檢測方法

組織流式檢測遵循標(biāo)準(zhǔn)化實驗流程,主要步驟包括:

  • 樣本制備:將組織樣本處理為單細(xì)胞懸液,并通過過濾去除團(tuán)塊;使用熒光標(biāo)記抗體對目標(biāo)抗原進(jìn)行特異性染色。
  • 數(shù)據(jù)采集:將染色后的細(xì)胞懸液上樣至流式細(xì)胞儀,通過激光激發(fā)熒光信號,由光電倍增管(PMT)捕獲散射光和熒光參數(shù)。
  • 數(shù)據(jù)分析:利用專業(yè)軟件(如FlowJo、BD FACSDiva)對原始數(shù)據(jù)進(jìn)行補(bǔ)償校正、設(shè)門分析及統(tǒng)計學(xué)處理,生成細(xì)胞亞群比例、熒光強(qiáng)度等定量結(jié)果。

檢測儀器

組織流式檢測的核心設(shè)備為流式細(xì)胞儀,其關(guān)鍵組件包括:

  • 激光器:提供不同波長的激發(fā)光(如488 nm藍(lán)激光、633 nm紅激光),適配多種熒光染料。
  • 光學(xué)系統(tǒng):由透鏡、濾光片和分光鏡組成,用于分離和收集散射光及熒光信號。
  • 檢測器:光電倍增管(PMT)將光信號轉(zhuǎn)化為電信號,實現(xiàn)高靈敏度檢測。
  • 液流系統(tǒng):通過鞘液包裹單細(xì)胞流,確保細(xì)胞逐一通過檢測區(qū)域。

主流品牌包括BD Biosciences(如BD FACSCanto II)、Beckman Coulter(如CytoFLEX)及Thermo Fisher(如Attune NxT)。輔助設(shè)備涵蓋離心機(jī)、渦旋振蕩器及生物安全柜,共同保障實驗的穩(wěn)定性和重復(fù)性。

結(jié)語

組織流式檢測憑借其高通量、多參數(shù)的優(yōu)勢,已成為生命科學(xué)研究和臨床診斷的重要工具。通過精準(zhǔn)解析細(xì)胞特性,該技術(shù)為疾病機(jī)制研究、藥物篩選及個體化治療提供了關(guān)鍵數(shù)據(jù)支持。未來,隨著新型熒光探針和自動化分析算法的發(fā)展,其應(yīng)用場景將進(jìn)一步拓展,推動精準(zhǔn)醫(yī)學(xué)邁向更高水平。

(本文內(nèi)容僅供參考,具體實驗方案需結(jié)合實際情況調(diào)整。)

實驗儀器

實驗室儀器 實驗室儀器 實驗室儀器 實驗室儀器

測試流程

組織流式檢測流程

注意事項

1.具體的試驗周期以工程師告知的為準(zhǔn)。

2.文章中的圖片或者標(biāo)準(zhǔn)以及具體的試驗方案僅供參考,因為每個樣品和項目都有所不同,所以最終以工程師告知的為準(zhǔn)。

3.關(guān)于(樣品量)的需求,最好是先咨詢我們的工程師確定,避免不必要的樣品損失。

4.加急試驗周期一般是五個工作日左右,部分樣品有所差異

5.如果對于(組織流式檢測)還有什么疑問,可以咨詢我們的工程師為您一一解答。

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