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細胞鐵離子檢測

原創(chuàng)發(fā)布者:北檢院    發(fā)布時間:2025-04-09     點擊數(shù):

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細胞鐵離子檢測技術解析

一、檢測樣品 細胞鐵離子檢測的樣品通常來源于體外培養(yǎng)的哺乳動物細胞或組織樣本。常見樣品類型包括:

  • 細胞系:如HepG2(肝癌細胞)、HEK293(人胚腎細胞)等。
  • 原代細胞:從動物或人體分離的特定組織細胞(如肝細胞、神經(jīng)細胞)。
  • 病理樣本:腫瘤組織、炎癥病變組織等。樣品需經(jīng)過預處理,包括細胞裂解、離心去除碎片,最終獲得澄清的細胞裂解液用于檢測。

二、檢測項目 鐵離子檢測的核心目標為定量分析細胞內的總鐵離子(Fe²?/Fe³?)及游離鐵離子(Labile Iron Pool, LIP)濃度。具體檢測項目包括:

  1. 總鐵含量:反映細胞內鐵儲存及代謝穩(wěn)態(tài)。
  2. 游離鐵濃度:與氧化應激、細胞凋亡等病理過程密切相關。

三、檢測方法 目前主流的鐵離子檢測方法包括比色法熒光探針法

  • 比色法:基于鐵離子與特定顯色劑(如菲啰啉、亞鐵嗪)的絡合反應,通過吸光度變化定量鐵離子濃度。該方法操作簡便,適用于高通量檢測。
  • 熒光探針法:使用特異性熒光染料(如Calcein-AM、RPA)標記游離鐵離子,通過熒光強度變化實現(xiàn)動態(tài)監(jiān)測,靈敏度高且可實時追蹤。

四、檢測儀器 鐵離子檢測需依賴高精度儀器設備,確保數(shù)據(jù)的準確性和重復性:

  1. 分光光度計:用于比色法檢測,測量波長范圍通常為500-600 nm(如Thermo Scientific Multiskan GO)。
  2. 熒光酶標儀:支持熒光探針法的多通道檢測(如BioTek Synergy H1)。
  3. 離心機與細胞破碎儀:用于樣品前處理,如細胞裂解與離心分離(Eppendorf Centrifuge 5430)。

五、注意事項

  • 樣品處理:避免金屬污染,需使用超純水及無鐵耗材。
  • 標準曲線:每次檢測需同步繪制標準曲線,確保定量準確性。
  • 數(shù)據(jù)解讀:結合細胞活性(如CCK-8法)排除細胞死亡對鐵離子濃度的干擾。

通過上述技術流程,細胞鐵離子檢測可廣泛應用于疾病機制研究、藥物毒性評估及營養(yǎng)學領域,為科學研究和臨床診斷提供關鍵數(shù)據(jù)支持。

實驗儀器

實驗室儀器 實驗室儀器 實驗室儀器 實驗室儀器

測試流程

細胞鐵離子檢測流程

注意事項

1.具體的試驗周期以工程師告知的為準。

2.文章中的圖片或者標準以及具體的試驗方案僅供參考,因為每個樣品和項目都有所不同,所以最終以工程師告知的為準。

3.關于(樣品量)的需求,最好是先咨詢我們的工程師確定,避免不必要的樣品損失。

4.加急試驗周期一般是五個工作日左右,部分樣品有所差異

5.如果對于(細胞鐵離子檢測)還有什么疑問,可以咨詢我們的工程師為您一一解答。

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