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質(zhì)譜蛋白檢測

原創(chuàng)發(fā)布者:北檢院    發(fā)布時(shí)間:2025-04-09     點(diǎn)擊數(shù):

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注意:因業(yè)務(wù)調(diào)整,暫不接受個(gè)人委托測試望見諒。

基于質(zhì)譜技術(shù)的蛋白質(zhì)組學(xué)檢測分析報(bào)告

檢測樣品

本次檢測樣品為人體血清樣本,來源于健康志愿者及特定疾病患者群體(樣本編號:SER-2023-001至SER-2023-050)。所有樣本均通過標(biāo)準(zhǔn)采集流程獲得,經(jīng)離心處理后分離出血清,并于-80℃超低溫冰箱保存,確保蛋白質(zhì)穩(wěn)定性。

檢測項(xiàng)目

  1. 蛋白質(zhì)鑒定:通過質(zhì)譜技術(shù)對血清中的蛋白質(zhì)成分進(jìn)行定性分析,明確表達(dá)蛋白種類。
  2. 定量分析:對比健康組與疾病組的差異表達(dá)蛋白,篩選潛在生物標(biāo)志物。
  3. 翻譯后修飾檢測:針對磷酸化、糖基化等修飾位點(diǎn)進(jìn)行鑒定,探索功能調(diào)控機(jī)制。

檢測方法

  1. 樣品預(yù)處理: 采用FASP(Filter-Aided Sample Preparation)法進(jìn)行蛋白質(zhì)酶解,使用胰蛋白酶將蛋白質(zhì)消化為肽段,并通過C18固相萃取柱脫鹽純化。
  2. 液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(LC-MS/MS): 肽段經(jīng)納升液相色譜(nano-LC)分離后,進(jìn)入高精度質(zhì)譜儀進(jìn)行離子化及碎裂分析。數(shù)據(jù)依賴采集模式(DDA)用于全面覆蓋低豐度蛋白。
  3. 數(shù)據(jù)庫搜索: 原始數(shù)據(jù)通過MaxQuant軟件匹配UniProt人類蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫,設(shè)置假陽性率(FDR)≤1%以確保結(jié)果可靠性。

檢測儀器

  1. 質(zhì)譜儀:Thermo Fisher Orbitrap Fusion Lumos Tribrid質(zhì)譜儀,具備超高分辨率(分辨率達(dá)240,000 @ m/z 200)及靈敏的離子傳輸效率,支持多級碎裂(MS/MS)分析。
  2. 液相色譜儀:EASY-nLC 1200系統(tǒng),配備75 μm內(nèi)徑分析柱,實(shí)現(xiàn)納升級別高效分離。
  3. 數(shù)據(jù)處理平臺(tái):Proteome Discoverer 2.5軟件,用于質(zhì)譜數(shù)據(jù)解析及生物信息學(xué)分析。

結(jié)果與應(yīng)用

本次檢測共鑒定到1,258種血清蛋白,其中23種蛋白在疾病組中顯著上調(diào)(如SAA1、CRP),17種蛋白顯著下調(diào)(如ALB、APOA1)。磷酸化修飾分析提示,疾病相關(guān)信號通路(如NF-κB、MAPK)的調(diào)控蛋白存在廣泛修飾。上述結(jié)果為疾病機(jī)制研究及臨床診斷標(biāo)志物開發(fā)提供了重要依據(jù)。

結(jié)論 基于高精度質(zhì)譜技術(shù)的蛋白質(zhì)組學(xué)檢測,能夠高效解析復(fù)雜生物樣本中的蛋白質(zhì)組成及動(dòng)態(tài)變化。結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)化流程與先進(jìn)儀器,該方法在疾病診斷、藥物靶點(diǎn)篩選及精準(zhǔn)醫(yī)學(xué)領(lǐng)域具有廣闊應(yīng)用前景。

實(shí)驗(yàn)儀器

實(shí)驗(yàn)室儀器 實(shí)驗(yàn)室儀器 實(shí)驗(yàn)室儀器 實(shí)驗(yàn)室儀器

測試流程

質(zhì)譜蛋白檢測流程

注意事項(xiàng)

1.具體的試驗(yàn)周期以工程師告知的為準(zhǔn)。

2.文章中的圖片或者標(biāo)準(zhǔn)以及具體的試驗(yàn)方案僅供參考,因?yàn)槊總€(gè)樣品和項(xiàng)目都有所不同,所以最終以工程師告知的為準(zhǔn)。

3.關(guān)于(樣品量)的需求,最好是先咨詢我們的工程師確定,避免不必要的樣品損失。

4.加急試驗(yàn)周期一般是五個(gè)工作日左右,部分樣品有所差異

5.如果對于(質(zhì)譜蛋白檢測)還有什么疑問,可以咨詢我們的工程師為您一一解答。

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