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蛋白純度檢測(cè)

原創(chuàng)發(fā)布者：北檢院發(fā)布時(shí)間：2025-04-09 點(diǎn)擊數(shù)：

獲取試驗(yàn)方案？獲取試驗(yàn)報(bào)價(jià)？獲取試驗(yàn)周期？

注意：因業(yè)務(wù)調(diào)整，暫不接受個(gè)人委托測(cè)試望見諒。

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<div class="article-content"> <h1>蛋白純度檢測(cè)方法與應(yīng)用</h1> <h2>檢測(cè)樣品</h2> 蛋白純度檢測(cè)的樣品主要包括重組蛋白、抗體、酶類、細(xì)胞裂解液及純化后的蛋白產(chǎn)物。這些樣品廣泛應(yīng)用于生物制藥、疾病診斷、疫苗研發(fā)及基礎(chǔ)科學(xué)研究領(lǐng)域。為確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性，樣品需在檢測(cè)前進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化處理，包括濃度調(diào)整、緩沖液置換及去除干擾物質(zhì)。 <h2>檢測(cè)項(xiàng)目</h2> 蛋白純度檢測(cè)的核心項(xiàng)目包括：總蛋白含量測(cè)定、雜質(zhì)分析（如核酸、脂類、宿主蛋白殘留）、目標(biāo)蛋白純度百分比計(jì)算及功能性驗(yàn)證。其中，目標(biāo)蛋白純度通常需通過多種技術(shù)聯(lián)合分析，以排除單一方法的局限性。 <h2>檢測(cè)方法</h2> <h3>1. 光譜分析法</h3> 紫外-可見分光光度法（UV-Vis）是快速測(cè)定蛋白濃度的常用方法，通過280 nm波長處的吸光度值（A<sub>280</sub>）估算蛋白含量。此外，BCA法（Bicinchoninic Acid Assay）和Bradford法通過顯色反應(yīng)定量總蛋白，靈敏度可達(dá)μg/mL級(jí)別。 <h3>2. 電泳技術(shù)</h3> SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS-PAGE）是評(píng)估蛋白純度的經(jīng)典方法。通過考馬斯亮藍(lán)或銀染顯色，可直觀判斷目標(biāo)蛋白條帶單一性及雜質(zhì)含量。高分辨率技術(shù)如毛細(xì)管電泳（CE）可進(jìn)一步區(qū)分分子量相近的雜質(zhì)。 <h3>3. 色譜分析</h3> 高效液相色譜（HPLC）和反相色譜（RP-HPLC）能夠定量分析蛋白純度。例如，尺寸排阻色譜（SEC-HPLC）通過分子量差異分離雜質(zhì)，檢測(cè)限低至0.1%。質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)（LC-MS）還可用于鑒定微量降解產(chǎn)物或翻譯后修飾。 <h2>檢測(cè)儀器</h2> 常用儀器包括： <ul> <li>分光光度計(jì)（如NanoDrop或BioTek系列）</li> <li>垂直電泳系統(tǒng)（Bio-Rad Mini-PROTEAN）</li> <li>高效液相色譜儀（Agilent 1260 Infinity II）</li> <li>酶標(biāo)儀（用于ELISA或比色法檢測(cè)）</li> </ul> 所有儀器均需定期進(jìn)行校準(zhǔn)，并符合ISO 17025認(rèn)證標(biāo)準(zhǔn)，以確保數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性。 </div>