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原位小鼠模型檢測

原創(chuàng)發(fā)布者:北檢院    發(fā)布時間:2025-04-09     點(diǎn)擊數(shù):

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原位小鼠模型檢測:樣品、方法與儀器解析

檢測樣品

本次實(shí)驗(yàn)以C57BL/6品系健康小鼠為研究對象,構(gòu)建原位腫瘤模型(如原位肝癌或乳腺癌模型)。實(shí)驗(yàn)組與對照組各包含10只小鼠,均為8周齡雌性,體重范圍為20-25克。樣品類型包括腫瘤組織切片、血液樣本(全血及血清)以及特定器官(如肝臟、肺臟)的病理標(biāo)本。

檢測項(xiàng)目

  1. 腫瘤生長動態(tài)監(jiān)測:記錄原位腫瘤的體積變化及轉(zhuǎn)移情況。
  2. 免疫微環(huán)境分析:檢測腫瘤浸潤淋巴細(xì)胞(TILs)的數(shù)量及亞型分布。
  3. 血清生物標(biāo)志物檢測:包括炎癥因子(IL-6、TNF-α)及腫瘤特異性蛋白(如AFP、CA15-3)。
  4. 組織病理學(xué)評估:通過H&E染色觀察腫瘤組織形態(tài)及壞死區(qū)域。
  5. 基因表達(dá)譜分析:篩選與腫瘤進(jìn)展相關(guān)的關(guān)鍵基因(如EGFR、VEGF)。

檢測方法

  1. 活體成像技術(shù): 采用小動物活體成像系統(tǒng)(IVIS Spectrum)對熒光標(biāo)記的腫瘤細(xì)胞進(jìn)行連續(xù)監(jiān)測,通過生物發(fā)光信號量化腫瘤負(fù)荷。
  2. 流式細(xì)胞術(shù): 使用抗CD3、CD4、CD8等熒光抗體標(biāo)記外周血及腫瘤組織懸液,分析免疫細(xì)胞亞群比例。
  3. 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA): 定量檢測血清中目標(biāo)蛋白濃度,實(shí)驗(yàn)嚴(yán)格遵循試劑盒(R&D Systems)操作流程。
  4. 免疫組化(IHC)與H&E染色: 石蠟包埋組織切片后,分別進(jìn)行H&E染色及抗體標(biāo)記(如Ki-67、CD31),評估增殖與血管生成狀態(tài)。
  5. 實(shí)時定量PCR(qPCR): 提取腫瘤組織RNA并反轉(zhuǎn)錄為cDNA,通過SYBR Green法檢測目標(biāo)基因表達(dá)水平。

檢測儀器

  1. 小動物活體成像系統(tǒng)(型號:PerkinElmer IVIS Spectrum): 用于非侵入性監(jiān)測腫瘤生長及轉(zhuǎn)移,靈敏度達(dá)皮摩爾級別。
  2. 流式細(xì)胞儀(型號:BD FACSCelesta): 配備三激光八色檢測通道,支持高精度免疫細(xì)胞分型。
  3. 全自動酶標(biāo)儀(型號:BioTek Synergy H1): 兼容吸光度、熒光及化學(xué)發(fā)光檢測模式,用于ELISA數(shù)據(jù)讀取。
  4. 病理切片掃描儀(型號:Leica Aperio AT2): 提供20倍光學(xué)放大,支持?jǐn)?shù)字化病理圖像分析與存儲。
  5. 實(shí)時熒光定量PCR儀(型號:Applied Biosystems QuantStudio 5): 支持96孔板快速檢測,溫度均一性誤差≤0.1°C。

結(jié)語

通過上述多維度檢測方法,本研究系統(tǒng)評估了原位小鼠模型中腫瘤進(jìn)展與宿主反應(yīng)的動態(tài)關(guān)聯(lián)?;铙w成像、流式分析及分子檢測技術(shù)的聯(lián)合應(yīng)用,為深入解析腫瘤微環(huán)境及開發(fā)靶向療法提供了可靠數(shù)據(jù)支持。

(本文為模擬實(shí)驗(yàn)流程,實(shí)際研究需遵循動物倫理規(guī)范并經(jīng)過機(jī)構(gòu)審查批準(zhǔn)。)

實(shí)驗(yàn)儀器

實(shí)驗(yàn)室儀器 實(shí)驗(yàn)室儀器 實(shí)驗(yàn)室儀器 實(shí)驗(yàn)室儀器

測試流程

原位小鼠模型檢測流程

注意事項(xiàng)

1.具體的試驗(yàn)周期以工程師告知的為準(zhǔn)。

2.文章中的圖片或者標(biāo)準(zhǔn)以及具體的試驗(yàn)方案僅供參考,因?yàn)槊總€樣品和項(xiàng)目都有所不同,所以最終以工程師告知的為準(zhǔn)。

3.關(guān)于(樣品量)的需求,最好是先咨詢我們的工程師確定,避免不必要的樣品損失。

4.加急試驗(yàn)周期一般是五個工作日左右,部分樣品有所差異

5.如果對于(原位小鼠模型檢測)還有什么疑問,可以咨詢我們的工程師為您一一解答。

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