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注意：因業(yè)務(wù)調(diào)整，暫不接受個(gè)人委托測(cè)試望見諒。

氧化應(yīng)激動(dòng)物模型檢測(cè)方法與分析

檢測(cè)樣品

實(shí)驗(yàn)選用健康成年Sprague-Dawley（SD）大鼠作為研究對(duì)象，通過腹腔注射**叔丁基過氧化氫（t-BHP）**建立急性氧化應(yīng)激模型。實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組各10只，實(shí)驗(yàn)組注射劑量為10 mg/kg體重的t-BHP，對(duì)照組注射等體積生理鹽水。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，采集大鼠血清、肝臟組織及腦組織樣本，用于后續(xù)檢測(cè)分析。

檢測(cè)項(xiàng)目

檢測(cè)指標(biāo)主要包括：

1. 氧化損傷標(biāo)志物：丙二醛（MDA）、蛋白質(zhì)羰基化水平（PC）。
2. 抗氧化酶活性：超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）、過氧化氫酶（CAT）。
3. 活性氧（ROS）水平：通過細(xì)胞或組織內(nèi)ROS熒光探針標(biāo)記進(jìn)行定量。
4. DNA氧化損傷：8-羥基脫氧鳥苷（8-OHdG）含量。

檢測(cè)方法

1. MDA檢測(cè)：采用硫代巴比妥酸（TBA）比色法。樣本與TBA試劑在酸性條件下加熱反應(yīng)，生成紅色產(chǎn)物，通過分光光度計(jì)在532 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，計(jì)算MDA濃度。
2. SOD、GSH-Px、CAT活性測(cè)定：使用商品化試劑盒（如南京建成生物工程研究所生產(chǎn)），通過酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué)法檢測(cè)。例如，SOD活性通過抑制鄰苯三酚自氧化速率計(jì)算，GSH-Px活性基于谷胱甘肽氧化還原反應(yīng)測(cè)定。
3. ROS檢測(cè)：組織樣本經(jīng)DCFH-DA熒光探針孵育后，通過流式細(xì)胞儀或熒光酶標(biāo)儀（激發(fā)波長(zhǎng)488 nm，發(fā)射波長(zhǎng)525 nm）檢測(cè)熒光強(qiáng)度。
4. 8-OHdG定量：采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA），使用特異性單克隆抗體包被微孔板，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣本中8-OHdG含量。

檢測(cè)儀器

1. 分光光度計(jì)：UV-1800型紫外可見分光光度計(jì)（日本島津公司），用于MDA、SOD等吸光度測(cè)定。
2. 酶標(biāo)儀：Synergy HTX多功能酶標(biāo)儀（美國(guó)BioTek公司），適用于ELISA及熒光信號(hào)檢測(cè)。
3. 流式細(xì)胞儀：BD FACSCanto II（美國(guó)BD公司），用于細(xì)胞或組織內(nèi)ROS水平的精確分析。
4. 高速低溫離心機(jī)：Centrifuge 5424R（德國(guó)Eppendorf公司），用于樣本前處理。
5. 組織勻漿器：TissueLyser LT（德國(guó)Qiagen公司），用于肝臟及腦組織破碎。

總結(jié)

通過上述檢測(cè)方法及儀器，可全面評(píng)估氧化應(yīng)激動(dòng)物模型中氧化損傷程度與抗氧化防御系統(tǒng)的變化。此類研究為揭示氧化應(yīng)激相關(guān)疾病的分子機(jī)制及藥物開發(fā)提供了重要實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

實(shí)驗(yàn)儀器

測(cè)試流程

注意事項(xiàng)

1.具體的試驗(yàn)周期以工程師告知的為準(zhǔn)。

2.文章中的圖片或者標(biāo)準(zhǔn)以及具體的試驗(yàn)方案僅供參考，因?yàn)槊總€(gè)樣品和項(xiàng)目都有所不同，所以最終以工程師告知的為準(zhǔn)。

3.關(guān)于（樣品量）的需求，最好是先咨詢我們的工程師確定，避免不必要的樣品損失。

4.加急試驗(yàn)周期一般是五個(gè)工作日左右，部分樣品有所差異

5.如果對(duì)于（氧化應(yīng)激動(dòng)物模型檢測(cè)）還有什么疑問，可以咨詢我們的工程師為您一一解答。