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細(xì)胞活性氧檢測(cè)

原創(chuàng)發(fā)布者：北檢院    發(fā)布時(shí)間：2025-04-09     點(diǎn)擊數(shù)：

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注意：因業(yè)務(wù)調(diào)整，暫不接受個(gè)人委托測(cè)試望見(jiàn)諒。

細(xì)胞活性氧（ROS）檢測(cè)技術(shù)解析

導(dǎo)語(yǔ) 活性氧（Reactive Oxygen Species, ROS）是細(xì)胞代謝過(guò)程中產(chǎn)生的一類具有強(qiáng)氧化性的小分子物質(zhì)，其水平異常與多種疾病（如癌癥、神經(jīng)退行性疾病等）密切相關(guān)。準(zhǔn)確檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)ROS水平，對(duì)研究氧化應(yīng)激機(jī)制、藥物篩選及毒性評(píng)價(jià)具有重要意義。本文重點(diǎn)介紹細(xì)胞活性氧檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)流程及技術(shù)要點(diǎn)。

一、檢測(cè)樣品

檢測(cè)樣品主要包括以下幾類：

  1. 細(xì)胞系：如HeLa、HEK293、HepG2等常用細(xì)胞系。
  2. 原代細(xì)胞：如從動(dòng)物或人體組織中分離的神經(jīng)元、肝細(xì)胞等。
  3. 組織樣本：如凍存或新鮮組織切片中的細(xì)胞。
  4. 藥物處理后的細(xì)胞：用于評(píng)價(jià)化合物對(duì)ROS生成或清除的影響。

樣品需預(yù)先進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化培養(yǎng)，確保細(xì)胞活率＞90%，并控制細(xì)胞密度（通常為1×10?~1×10?個(gè)/孔）。

二、檢測(cè)項(xiàng)目

檢測(cè)的核心項(xiàng)目為細(xì)胞內(nèi)活性氧水平，具體包括：

  • 基礎(chǔ)ROS水平：未處理細(xì)胞中ROS的基線濃度。
  • 誘導(dǎo)/抑制ROS水平：通過(guò)氧化應(yīng)激誘導(dǎo)劑（如H?O?）或抗氧化劑（如NAC）處理后的ROS變化。
  • 動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)：時(shí)間梯度或劑量依賴性的ROS生成趨勢(shì)。

三、檢測(cè)方法

目前主流的檢測(cè)方法為熒光探針?lè)?/strong>，以DCFH-DA（2&39;,7&39;-二氯二氫熒光素二乙酸酯）為例：

  1. 探針加載：將DCFH-DA探針與細(xì)胞共孵育（濃度10-20 μM，時(shí)間30-60分鐘）。
  2. 刺激處理：加入ROS誘導(dǎo)劑或抑制劑，設(shè)置對(duì)照組。
  3. 熒光檢測(cè)：探針被ROS氧化后生成綠色熒光物質(zhì)DCF，通過(guò)熒光強(qiáng)度定量ROS水平。

此方法靈敏度高、操作簡(jiǎn)便，適用于高通量篩選。

四、檢測(cè)儀器

檢測(cè)過(guò)程需依賴以下儀器設(shè)備：

  1. 熒光酶標(biāo)儀：用于96孔板或384孔板的批量檢測(cè)（激發(fā)波長(zhǎng)485 nm，發(fā)射波長(zhǎng)535 nm）。
  2. 流式細(xì)胞儀：?jiǎn)渭?xì)胞水平分析ROS分布及異質(zhì)性。
  3. 激光共聚焦顯微鏡：實(shí)時(shí)觀察ROS的亞細(xì)胞定位（如線粒體、細(xì)胞質(zhì)）。
  4. 低溫離心機(jī)：用于細(xì)胞沉淀及探針清洗步驟。

結(jié)語(yǔ) 細(xì)胞活性氧檢測(cè)是氧化應(yīng)激研究中的關(guān)鍵技術(shù)，其精準(zhǔn)性依賴于樣品制備、探針選擇及儀器參數(shù)的優(yōu)化。隨著新型熒光探針（如MitoSOX™針對(duì)線粒體ROS）的開(kāi)發(fā)，該技術(shù)將進(jìn)一步推動(dòng)疾病機(jī)制與藥物研發(fā)領(lǐng)域的突破。

（如需進(jìn)一步了解實(shí)驗(yàn)方案或設(shè)備詳情，請(qǐng)聯(lián)系專業(yè)技術(shù)人員獲取支持。）

實(shí)驗(yàn)儀器

實(shí)驗(yàn)室儀器 實(shí)驗(yàn)室儀器 實(shí)驗(yàn)室儀器 實(shí)驗(yàn)室儀器

測(cè)試流程

細(xì)胞活性氧檢測(cè)流程

注意事項(xiàng)

1.具體的試驗(yàn)周期以工程師告知的為準(zhǔn)。

2.文章中的圖片或者標(biāo)準(zhǔn)以及具體的試驗(yàn)方案僅供參考，因?yàn)槊總€(gè)樣品和項(xiàng)目都有所不同，所以最終以工程師告知的為準(zhǔn)。

3.關(guān)于（樣品量）的需求，最好是先咨詢我們的工程師確定，避免不必要的樣品損失。

4.加急試驗(yàn)周期一般是五個(gè)工作日左右，部分樣品有所差異

5.如果對(duì)于（細(xì)胞活性氧檢測(cè)）還有什么疑問(wèn)，可以咨詢我們的工程師為您一一解答。

  • 服務(wù)保障 一對(duì)一品質(zhì)服務(wù)
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