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細胞內鐵離子檢測

原創(chuàng)發(fā)布者:北檢院    發(fā)布時間:2025-04-08     點擊數(shù):

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細胞內鐵離子檢測技術與方法

檢測樣品

細胞內鐵離子檢測的樣品通常來源于體外培養(yǎng)的細胞系或原代細胞。常見樣品包括:

  • 人肝癌細胞(HepG2):廣泛應用于鐵代謝相關研究。
  • 人宮頸癌細胞(HeLa):用于探究鐵離子在腫瘤細胞中的分布與功能。
  • 原代肝細胞或神經(jīng)元細胞:用于研究鐵離子在特定組織中的代謝機制。

檢測項目

細胞內鐵離子檢測的核心目標是量化鐵離子濃度及其動態(tài)變化,具體檢測內容包括:

  1. 總鐵離子濃度:反映細胞內鐵儲存狀態(tài)。
  2. 亞細胞鐵離子定位:分析鐵離子在線粒體、溶酶體等細胞器中的分布。
  3. 鐵離子動態(tài)平衡:評估鐵吸收、轉運及釋放的調控機制。

檢測方法

目前主流的檢測技術包括以下三類:

1. 分光光度法

通過鐵離子與顯色試劑的特異性反應生成有色化合物,利用吸光度值計算鐵濃度。常用試劑包括菲啰嗪(Ferrozine)和亞鐵嗪(Ferene)。該方法靈敏度高,適用于批量樣品檢測。

2. 熒光探針法

利用熒光染料(如Calcein、Rhodamine B)與鐵離子結合后熒光信號的改變,實現(xiàn)實時、動態(tài)檢測。例如,Calcein-AM進入細胞后水解為Calcein,與游離鐵結合后熒光淬滅,通過顯微鏡或流式細胞儀定量分析。

3. 電化學檢測法

基于鐵離子的氧化還原特性,使用微電極或納米傳感器直接測量細胞裂解液中的鐵含量。該方法特異性強,適合痕量鐵離子檢測。

檢測儀器

根據(jù)檢測方法的不同,需選用以下儀器設備:

  • 紫外-可見分光光度計:用于分光光度法,測定顯色反應后的吸光度值(波長范圍:500-600 nm)。
  • 熒光顯微鏡/共聚焦顯微鏡:配合熒光探針,實現(xiàn)亞細胞水平鐵離子可視化分析。
  • 流式細胞儀:高通量檢測細胞群體內鐵離子分布差異。
  • 電化學工作站:支持微電極信號的采集與處理,適用于高精度定量分析。

總結

細胞內鐵離子檢測是研究鐵代謝疾病、神經(jīng)退行性疾病及癌癥的重要技術手段。通過選擇適配的樣品、檢測方法和儀器,可精準解析鐵離子的生物學功能,為疾病機制研究與藥物開發(fā)提供數(shù)據(jù)支持。


復制
導出
重新生成

實驗儀器

實驗室儀器 實驗室儀器 實驗室儀器 實驗室儀器

測試流程

細胞內鐵離子檢測流程

注意事項

1.具體的試驗周期以工程師告知的為準。

2.文章中的圖片或者標準以及具體的試驗方案僅供參考,因為每個樣品和項目都有所不同,所以最終以工程師告知的為準。

3.關于(樣品量)的需求,最好是先咨詢我們的工程師確定,避免不必要的樣品損失。

4.加急試驗周期一般是五個工作日左右,部分樣品有所差異

5.如果對于(細胞內鐵離子檢測)還有什么疑問,可以咨詢我們的工程師為您一一解答。

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