獲取試驗方案？獲取試驗報價？獲取試驗周期？

注意：因業(yè)務(wù)調(diào)整，暫不接受個人委托測試望見諒。

細胞培養(yǎng)液中葡萄糖濃度檢測方法與流程解析

在細胞培養(yǎng)過程中，葡萄糖作為細胞代謝的主要能量來源，其濃度變化直接影響細胞生長狀態(tài)和產(chǎn)物合成效率。因此，準(zhǔn)確檢測培養(yǎng)液中的葡萄糖濃度是優(yōu)化培養(yǎng)工藝和評估細胞代謝活性的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。以下從檢測樣品、項目、方法及儀器等方面進行詳細介紹。

一、檢測樣品

檢測對象為細胞培養(yǎng)液，包括：

1. 哺乳動物細胞（如CHO、HEK293）培養(yǎng)液；
2. 微生物（如大腸桿菌、酵母）發(fā)酵液；
3. 貼壁或懸浮培養(yǎng)體系的廢棄培養(yǎng)液或?qū)崟r取樣液。

樣品需在無菌條件下采集，離心去除細胞碎片后，取上清液進行檢測。

二、檢測項目

1. 葡萄糖濃度：定量分析培養(yǎng)液中葡萄糖的實時含量；
2. 葡萄糖代謝速率：通過多時間點檢測計算單位時間內(nèi)葡萄糖消耗量；
3. 殘留葡萄糖量：培養(yǎng)結(jié)束后剩余葡萄糖濃度，用于評估代謝終點。

三、檢測方法

1. 酶標(biāo)法（GOD-POD法）

原理：葡萄糖氧化酶（GOD）催化葡萄糖生成過氧化氫（H?O?），過氧化物酶（POD）進一步催化H?O?與顯色劑（如鄰聯(lián)茴香胺）反應(yīng)，生成有色產(chǎn)物。通過吸光度值計算葡萄糖濃度。 步驟：

• 取50 μL樣品與200 μL GOD-POD試劑混合；
• 37℃孵育15分鐘；
• 使用酶標(biāo)儀測定505 nm波長下的吸光度，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線換算濃度。

2. 比色法（DNS法）

原理：3,5-二硝基水楊酸（DNS）在堿性條件下與葡萄糖還原產(chǎn)物（如葡萄糖酸）反應(yīng)，生成棕紅色絡(luò)合物，通過比色定量。 步驟：

• 樣品與DNS試劑混合后沸水浴5分鐘；
• 冷卻后測定540 nm吸光度，對照標(biāo)準(zhǔn)曲線計算濃度。

3. 生物傳感器法

原理：利用葡萄糖氧化酶固定化電極，實時檢測葡萄糖氧化產(chǎn)生的電流信號，直接輸出濃度值。

四、檢測儀器

1. 酶標(biāo)儀（如BioTek Synergy H1）：適用于高通量酶標(biāo)法檢測，支持多波長分析；
2. 分光光度計（如Thermo Scientific NanoDrop）：用于比色法單樣品快速檢測；
3. 生物傳感器分析儀（如YSI 2900）：實現(xiàn)實時在線監(jiān)測，適用于發(fā)酵罐集成系統(tǒng)；
4. 高效液相色譜（HPLC）：搭配示差折光檢測器，可同時檢測葡萄糖及其他碳源成分。

五、應(yīng)用與意義

通過精準(zhǔn)檢測葡萄糖濃度，研究人員可動態(tài)調(diào)整補料策略，避免營養(yǎng)缺乏或代謝副產(chǎn)物（如乳酸）積累，從而提升細胞密度和產(chǎn)物得率。此外，該數(shù)據(jù)還可用于構(gòu)建代謝模型，為工藝放大提供理論依據(jù)。

關(guān)鍵詞：細胞培養(yǎng)、葡萄糖檢測、GOD-POD法、酶標(biāo)儀、代謝調(diào)控

實驗儀器

測試流程

注意事項

1.具體的試驗周期以工程師告知的為準(zhǔn)。

2.文章中的圖片或者標(biāo)準(zhǔn)以及具體的試驗方案僅供參考，因為每個樣品和項目都有所不同，所以最終以工程師告知的為準(zhǔn)。

3.關(guān)于（樣品量）的需求，最好是先咨詢我們的工程師確定，避免不必要的樣品損失。

4.加急試驗周期一般是五個工作日左右，部分樣品有所差異

5.如果對于（細胞培養(yǎng)葡萄糖檢測）還有什么疑問，可以咨詢我們的工程師為您一一解答。