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谷胱甘肽檢測(cè)

原創(chuàng)發(fā)布者:北檢院    發(fā)布時(shí)間:2025-04-08     點(diǎn)擊數(shù):

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谷胱甘肽檢測(cè):方法與應(yīng)用

谷胱甘肽(Glutathione,GSH)是一種重要的內(nèi)源性抗氧化劑,廣泛參與生物體內(nèi)的氧化還原反應(yīng)、解毒過程及細(xì)胞保護(hù)機(jī)制。其含量的檢測(cè)在生物醫(yī)學(xué)研究、臨床診斷及藥物開發(fā)中具有重要意義。以下將詳細(xì)介紹谷胱甘肽檢測(cè)的樣品類型、檢測(cè)項(xiàng)目、方法及儀器。

檢測(cè)樣品

谷胱甘肽檢測(cè)的常見樣品包括:

  • 生物體液:如血液(全血、血漿、血清)、尿液等。
  • 組織樣本:如肝臟、腎臟、腦組織等需經(jīng)勻漿處理后的提取液。
  • 細(xì)胞培養(yǎng)液:細(xì)胞裂解液或培養(yǎng)基中的谷胱甘肽含量分析。
  • 植物或微生物樣本:如植物葉片、微生物培養(yǎng)液等。

樣品的預(yù)處理需避免氧化或降解,通常需低溫保存并加入抗氧化劑(如乙二胺四乙酸,EDTA)。

檢測(cè)項(xiàng)目

  1. 總谷胱甘肽(Total GSH):包括還原型谷胱甘肽(GSH)和氧化型谷胱甘肽(GSSG)的總量。
  2. GSH/GSSG比值:反映細(xì)胞氧化還原狀態(tài)的重要指標(biāo)。
  3. 谷胱甘肽相關(guān)酶活性:如谷胱甘肽過氧化物酶(GPx)、谷胱甘肽還原酶(GR)等。

檢測(cè)方法

目前主流的谷胱甘肽檢測(cè)方法包括:

1. 分光光度法

  • 原理:利用谷胱甘肽與特定試劑(如DTNB,5,5&39;-二硫代雙-2-硝基苯甲酸)反應(yīng)生成有色化合物,通過吸光度值定量。
  • 步驟:樣品處理后,加入DTNB顯色,測(cè)定412 nm波長(zhǎng)下的吸光度,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算濃度。
  • 特點(diǎn):操作簡(jiǎn)便、成本低,適用于大批量樣本篩查。

2. 高效液相色譜法(HPLC)

  • 原理:通過色譜柱分離GSH和GSSG,結(jié)合熒光檢測(cè)器或紫外檢測(cè)器進(jìn)行定量。
  • 步驟:樣品經(jīng)衍生化處理后進(jìn)樣,根據(jù)保留時(shí)間和峰面積計(jì)算濃度。
  • 特點(diǎn):靈敏度高、特異性強(qiáng),可同時(shí)檢測(cè)GSH和GSSG。

3. 酶循環(huán)法

  • 原理:利用谷胱甘肽還原酶(GR)將GSSG還原為GSH,同時(shí)消耗NADPH,通過監(jiān)測(cè)340 nm波長(zhǎng)下NADPH的吸光度變化計(jì)算總GSH含量。
  • 特點(diǎn):高靈敏度,適用于微量樣本檢測(cè)。

檢測(cè)儀器

根據(jù)檢測(cè)方法的不同,常用儀器包括:

  1. 紫外-可見分光光度計(jì):如島津UV-1800、Thermo Scientific NanoDrop系列,用于分光光度法和酶循環(huán)法。
  2. 高效液相色譜儀(HPLC):如Agilent 1260系列、Waters Alliance系列,配備熒光或紫外檢測(cè)器。
  3. 酶標(biāo)儀:如BioTek Synergy H1,適用于微孔板形式的高通量檢測(cè)。

結(jié)語

谷胱甘肽檢測(cè)是評(píng)估生物體抗氧化能力及氧化應(yīng)激水平的關(guān)鍵手段。通過選擇合適的樣品類型、檢測(cè)方法及儀器,可精準(zhǔn)獲得GSH含量及其代謝相關(guān)數(shù)據(jù),為疾病機(jī)制研究、藥物療效評(píng)價(jià)及營養(yǎng)學(xué)分析提供科學(xué)依據(jù)。隨著檢測(cè)技術(shù)的不斷優(yōu)化,谷胱甘肽檢測(cè)將在更多領(lǐng)域展現(xiàn)其應(yīng)用價(jià)值。

實(shí)驗(yàn)儀器

實(shí)驗(yàn)室儀器 實(shí)驗(yàn)室儀器 實(shí)驗(yàn)室儀器 實(shí)驗(yàn)室儀器

測(cè)試流程

谷胱甘肽檢測(cè)流程

注意事項(xiàng)

1.具體的試驗(yàn)周期以工程師告知的為準(zhǔn)。

2.文章中的圖片或者標(biāo)準(zhǔn)以及具體的試驗(yàn)方案僅供參考,因?yàn)槊總€(gè)樣品和項(xiàng)目都有所不同,所以最終以工程師告知的為準(zhǔn)。

3.關(guān)于(樣品量)的需求,最好是先咨詢我們的工程師確定,避免不必要的樣品損失。

4.加急試驗(yàn)周期一般是五個(gè)工作日左右,部分樣品有所差異

5.如果對(duì)于(谷胱甘肽檢測(cè))還有什么疑問,可以咨詢我們的工程師為您一一解答。

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