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活細胞內(nèi)鈣離子濃度檢測

原創(chuàng)發(fā)布者:北檢院    發(fā)布時間:2025-04-08     點擊數(shù):

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活細胞內(nèi)鈣離子濃度檢測技術(shù)解析

鈣離子(Ca²?)作為細胞內(nèi)重要的第二信使,參與調(diào)控細胞增殖、分化、凋亡及信號轉(zhuǎn)導等關(guān)鍵生命活動。實時監(jiān)測活細胞內(nèi)鈣離子濃度的動態(tài)變化,對揭示其生理功能及病理機制具有重要意義。本文將從檢測樣品、檢測項目、檢測方法及檢測儀器四個方面,系統(tǒng)介紹活細胞內(nèi)鈣離子濃度的檢測技術(shù)。

一、檢測樣品

活細胞內(nèi)鈣離子濃度的檢測對象主要為體外培養(yǎng)的哺乳動物細胞,常見類型包括:

  1. 原代細胞:如神經(jīng)元、心肌細胞、肝細胞等,能夠反映特定組織的生理特性。
  2. 腫瘤細胞系:如HeLa細胞、A549細胞等,用于研究癌癥相關(guān)信號通路。
  3. 基因編輯細胞:通過CRISPR技術(shù)構(gòu)建的鈣離子通道或受體突變細胞,用于機制研究。

二、檢測項目

檢測的核心目標為活細胞內(nèi)鈣離子濃度的動態(tài)變化,具體包括:

  1. 基礎(chǔ)鈣離子水平:靜息狀態(tài)下胞內(nèi)鈣離子的穩(wěn)態(tài)濃度。
  2. 鈣瞬變信號:細胞受外界刺激(如激素、藥物、電信號)后鈣離子的瞬時波動。
  3. 空間分布特征:鈣離子在細胞質(zhì)、細胞器(如內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、線粒體)內(nèi)的區(qū)域性濃度差異。

三、檢測方法

目前主流的檢測技術(shù)基于熒光探針法,具有高靈敏度和實時監(jiān)測優(yōu)勢:

  1. 化學熒光染料法
    • Fluo-4、Fura-2:此類染料與鈣離子結(jié)合后熒光強度增強,通過熒光顯微鏡或分光光度計定量分析。
    • Rhod-2:特異性標記線粒體內(nèi)鈣離子,適用于細胞器水平研究。
  2. 基因編碼鈣指示劑(GECIs)
    • GCaMP系列:將綠色熒光蛋白(GFP)與鈣調(diào)蛋白融合,通過基因轉(zhuǎn)染在細胞內(nèi)表達,實現(xiàn)長期動態(tài)追蹤。

四、檢測儀器

  1. 激光共聚焦顯微鏡
    • 型號:如Zeiss LSM 980、Leica SP8,支持高分辨率成像及三維鈣信號重建。
  2. 熒光分光光度計
    • 功能:批量檢測細胞懸液的熒光強度,適用于高通量藥物篩選。
  3. 流式細胞儀
    • 應用:快速分析群體細胞的鈣離子濃度分布,統(tǒng)計異質(zhì)性特征。

五、檢測意義

通過活細胞鈣離子檢測技術(shù),可深入探究心血管疾病、神經(jīng)退行性疾病及癌癥的分子機制,同時為靶向鈣信號通路的藥物開發(fā)提供數(shù)據(jù)支持。隨著新型探針和成像技術(shù)的迭代,該領(lǐng)域的研究精度與應用范圍將持續(xù)拓展。

結(jié)語 活細胞內(nèi)鈣離子濃度的精準檢測是連接細胞生物學與臨床醫(yī)學的重要橋梁。未來,多模態(tài)檢測技術(shù)與人工智能分析的結(jié)合,有望為鈣信號研究開辟全新維度。

實驗儀器

實驗室儀器 實驗室儀器 實驗室儀器 實驗室儀器

測試流程

活細胞內(nèi)鈣離子濃度檢測流程

注意事項

1.具體的試驗周期以工程師告知的為準。

2.文章中的圖片或者標準以及具體的試驗方案僅供參考,因為每個樣品和項目都有所不同,所以最終以工程師告知的為準。

3.關(guān)于(樣品量)的需求,最好是先咨詢我們的工程師確定,避免不必要的樣品損失。

4.加急試驗周期一般是五個工作日左右,部分樣品有所差異

5.如果對于(活細胞內(nèi)鈣離子濃度檢測)還有什么疑問,可以咨詢我們的工程師為您一一解答。

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