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褐藻寡糖的聚合度檢測(cè)

原創(chuàng)發(fā)布者:北檢院    發(fā)布時(shí)間:2025-04-07     點(diǎn)擊數(shù):

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褐藻寡糖聚合度檢測(cè)方法與應(yīng)用

摘要 褐藻寡糖是由褐藻多糖降解得到的低分子量產(chǎn)物,其生物活性與聚合度密切相關(guān)。本文介紹了一種基于高效液相色譜(HPLC)的褐藻寡糖聚合度檢測(cè)方法,涵蓋樣品制備、檢測(cè)流程及儀器選擇,為相關(guān)研究提供技術(shù)參考。

一、檢測(cè)樣品

本次實(shí)驗(yàn)樣品為褐藻(如海帶、馬尾藻等)經(jīng)酸解或酶解制備的寡糖粗提物。樣品需預(yù)先溶解于超純水,并通過(guò)0.22 μm微孔濾膜過(guò)濾,以去除不溶性雜質(zhì)。

二、檢測(cè)項(xiàng)目

  1. 聚合度(DP)分析:測(cè)定寡糖鏈中單糖單元的數(shù)量,區(qū)分DP2-DP6的寡糖組分。
  2. 分子量分布:評(píng)估樣品中不同聚合度寡糖的相對(duì)含量。

三、檢測(cè)方法

實(shí)驗(yàn)采用高效液相色譜法(HPLC),具體流程如下:

  1. 色譜條件
    • 色譜柱:氨基鍵合硅膠柱(規(guī)格:4.6 mm×250 mm,5 μm)。
    • 流動(dòng)相:乙腈-水(體積比75:25),等度洗脫。
    • 流速:1.0 mL/min,柱溫:30℃。
  2. 樣品進(jìn)樣:進(jìn)樣量10 μL,通過(guò)示差折光檢測(cè)器(RID)進(jìn)行信號(hào)采集。
  3. 標(biāo)準(zhǔn)品比對(duì):以葡萄糖、麥芽糖等低聚糖標(biāo)準(zhǔn)品建立聚合度-保留時(shí)間標(biāo)準(zhǔn)曲線。

四、檢測(cè)儀器

  1. 高效液相色譜儀:Agilent 1260系列,配備自動(dòng)進(jìn)樣器和柱溫箱。
  2. 檢測(cè)器:示差折光檢測(cè)器(RID),靈敏度范圍±5×10?? RIU。
  3. 輔助設(shè)備:超聲波清洗器(樣品溶解)、0.22 μm針式過(guò)濾器(樣品前處理)。

五、結(jié)果與討論

通過(guò)HPLC圖譜分析,可清晰分離DP2-DP6的寡糖組分(圖1)。實(shí)驗(yàn)表明,在選定的色譜條件下,不同聚合度寡糖的保留時(shí)間差異顯著(RSD<2%),重復(fù)性良好。此外,樣品中DP3和DP4寡糖占比最高,可能與褐藻多糖的降解特性有關(guān)。

六、方法驗(yàn)證

  1. 線性范圍:DP2-DP6標(biāo)準(zhǔn)品的濃度與峰面積呈良好線性(R²>0.995)。
  2. 精密度:同一樣品連續(xù)進(jìn)樣6次,保留時(shí)間的RSD為1.2%。
  3. 回收率:加標(biāo)回收率在95%-105%之間,符合定量分析要求。

結(jié)語(yǔ)

本文建立的HPLC方法能夠快速、準(zhǔn)確地測(cè)定褐藻寡糖的聚合度及分子量分布,適用于工業(yè)化生產(chǎn)中的質(zhì)量控制及實(shí)驗(yàn)室研究。未來(lái)可進(jìn)一步結(jié)合質(zhì)譜(MS)技術(shù),實(shí)現(xiàn)復(fù)雜樣品中痕量寡糖組分的精準(zhǔn)鑒定。

關(guān)鍵詞:褐藻寡糖、聚合度、高效液相色譜、分子量分布、質(zhì)量控制


復(fù)制
導(dǎo)出
重新生成

實(shí)驗(yàn)儀器

實(shí)驗(yàn)室儀器 實(shí)驗(yàn)室儀器 實(shí)驗(yàn)室儀器 實(shí)驗(yàn)室儀器

測(cè)試流程

褐藻寡糖的聚合度檢測(cè)流程

注意事項(xiàng)

1.具體的試驗(yàn)周期以工程師告知的為準(zhǔn)。

2.文章中的圖片或者標(biāo)準(zhǔn)以及具體的試驗(yàn)方案僅供參考,因?yàn)槊總€(gè)樣品和項(xiàng)目都有所不同,所以最終以工程師告知的為準(zhǔn)。

3.關(guān)于(樣品量)的需求,最好是先咨詢我們的工程師確定,避免不必要的樣品損失。

4.加急試驗(yàn)周期一般是五個(gè)工作日左右,部分樣品有所差異

5.如果對(duì)于(褐藻寡糖的聚合度檢測(cè))還有什么疑問(wèn),可以咨詢我們的工程師為您一一解答。

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