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紫外吸收光譜檢測

原創(chuàng)發(fā)布者:北檢院    發(fā)布時間:2025-04-04     點擊數(shù):

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紫外吸收光譜檢測是一種基于物質(zhì)分子對紫外光(通常指200-400 nm波長范圍)吸收特性的分析方法,廣泛應用于化學、生物、醫(yī)藥和環(huán)境等領域。以下是其關鍵要點:

1. 基本原理

  • 電子躍遷:紫外光能量使分子中的電子從基態(tài)躍遷到激發(fā)態(tài)(如π→π*、n→π*躍遷)。
  • 吸收定律:遵循朗伯-比爾定律:?=?⋅?⋅?A=ε⋅c⋅l,其中:
    • ?A:吸光度
    • ?ε:摩爾吸光系數(shù)(L·mol?¹·cm?¹)
    • ?c:溶液濃度(mol/L)
    • ?l:光程(比色皿厚度,cm)

2. 儀器組成

  • 光源:氘燈(紫外區(qū))、鎢燈(可見光區(qū))。
  • 單色器:分光,選擇特定波長。
  • 樣品池:石英比色皿(適用于紫外光,玻璃會吸收紫外光)。
  • 檢測器:光電倍增管或CCD,將光信號轉為電信號。

3. 檢測步驟

  1. 樣品準備:溶解樣品于透明溶劑(如水、乙醇、乙腈),避免溶劑在檢測波長處有吸收。
  2. 基線校正:用純?nèi)軇┳鳛榭瞻?,扣除背景干擾。
  3. 掃描光譜:記錄樣品在紫外區(qū)的吸收曲線,確定最大吸收波長(?maxλmax?)。
  4. 定量分析:在?maxλmax?處測定吸光度,通過標準曲線計算濃度。

4. 應用領域

  • 定量分析:測定溶液中物質(zhì)的濃度(如蛋白質(zhì)、核酸、藥物)。
  • 純度檢測:通過吸收峰形和位置判斷樣品純度(如是否存在雜質(zhì)吸收)。
  • 結構鑒定:輔助推斷有機物結構(如共軛體系、芳香環(huán)的存在)。
  • 動力學研究:監(jiān)測反應過程中吸光度變化,推算反應速率。

5. 注意事項

  • 溶劑選擇:確保溶劑在檢測波長范圍內(nèi)透明(例如:水適用于>190 nm,乙醇適用于>210 nm)。
  • 濃度控制:吸光度建議在0.2-1.0之間(避免偏離朗伯-比爾定律)。
  • 干擾排除:避免溶液中存在氣泡、懸浮顆粒或強吸收雜質(zhì)。
  • 儀器維護:定期校準波長準確性,清潔比色皿。

6. 常見問題

  • 基線漂移:可能由光源不穩(wěn)定或溫度變化引起。
  • 吸收峰過強/過弱:需調(diào)整樣品濃度或稀釋倍數(shù)。
  • 溶劑峰干擾:更換溶劑或選擇更長檢測波長。

示例應用

  • DNA濃度測定:在260 nm處測定吸光度,1 OD≈50 μg/mL(雙鏈DNA)。
  • 藥物分析:如測定阿司匹林在275 nm處的吸光度進行定量。
  • 環(huán)境監(jiān)測:檢測水中苯酚類污染物(紫外特征吸收約270 nm)。

如果需要更深入的操作細節(jié)或具體應用場景,可以進一步說明需求!

實驗儀器

實驗室儀器 實驗室儀器 實驗室儀器 實驗室儀器

測試流程

紫外吸收光譜檢測流程

注意事項

1.具體的試驗周期以工程師告知的為準。

2.文章中的圖片或者標準以及具體的試驗方案僅供參考,因為每個樣品和項目都有所不同,所以最終以工程師告知的為準。

3.關于(樣品量)的需求,最好是先咨詢我們的工程師確定,避免不必要的樣品損失。

4.加急試驗周期一般是五個工作日左右,部分樣品有所差異

5.如果對于(紫外吸收光譜檢測)還有什么疑問,可以咨詢我們的工程師為您一一解答。

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