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代謝物免疫印跡檢測(Western Blot)

原創(chuàng)發(fā)布者:北檢院    發(fā)布時間:2025-06-19     點擊數(shù):

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信息概要

代謝物免疫印跡檢測(Western Blot)是一種廣泛應(yīng)用于蛋白質(zhì)檢測的高特異性技術(shù),通過抗體與目標(biāo)蛋白的結(jié)合實現(xiàn)對特定代謝物的定性與半定量分析。該技術(shù)結(jié)合了電泳分離與免疫檢測的優(yōu)勢,能夠精確識別低豐度蛋白,在疾病診斷、生物標(biāo)志物篩選、藥物研發(fā)及基礎(chǔ)研究中具有重要價值。第三方檢測機(jī)構(gòu)提供專業(yè)、高效的Western Blot服務(wù),確保數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性和可重復(fù)性,為客戶提供可靠的科研與臨床支持。

檢測項目

葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白GLUT1, 脂肪酸合成酶FASN, 丙酮酸激酶PKM2, 乳酸脫氫酶LDH, 乙酰輔酶A羧化酶ACC, 磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶PEPCK, 蘋果酸酶ME1, 己糖激酶HK2, 三磷酸腺苷合酶ATP5A, 琥珀酸脫氫酶SDHB, 細(xì)胞色素C氧化酶COX4, 過氧化物酶體增殖物激活受體PPARγ, 哺乳動物雷帕霉素靶蛋白mTOR, 腺苷酸活化蛋白激酶AMPK, 缺氧誘導(dǎo)因子HIF-1α, 核因子κB p65, 白細(xì)胞介素IL-6, 腫瘤壞死因子TNF-α, 轉(zhuǎn)化生長因子TGF-β, 胰島素受體底物IRS1

檢測范圍

糖代謝相關(guān)蛋白, 脂代謝相關(guān)蛋白, 氨基酸代謝相關(guān)蛋白, 能量代謝相關(guān)酶, 信號通路調(diào)控蛋白, 炎癥因子, 細(xì)胞因子, 氧化應(yīng)激標(biāo)志物, 線粒體功能蛋白, 轉(zhuǎn)錄因子, 表觀遺傳修飾酶, 自噬相關(guān)蛋白, 凋亡相關(guān)蛋白, 細(xì)胞周期調(diào)控蛋白, 受體酪氨酸激酶, 膜轉(zhuǎn)運蛋白, 免疫檢查點蛋白, 腫瘤標(biāo)志物, 神經(jīng)遞質(zhì)合成酶, 激素受體

檢測方法

SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE):通過變性電泳分離蛋白質(zhì)混合物。

濕式轉(zhuǎn)印法:將凝膠中的蛋白轉(zhuǎn)移至PVDF或NC膜。

半干轉(zhuǎn)印法:快速高效的蛋白轉(zhuǎn)印技術(shù)。

封閉處理:使用BSA或脫脂牛奶阻斷非特異性結(jié)合位點。

一抗孵育:特異性識別目標(biāo)蛋白的一級抗體反應(yīng)。

二抗孵育:標(biāo)記酶或熒光基團(tuán)的二級抗體放大信號。

化學(xué)發(fā)光法(ECL):通過辣根過氧化物酶催化發(fā)光底物檢測。

熒光Western Blot:采用熒光標(biāo)記二抗進(jìn)行多色檢測。

定量分析:通過灰度掃描和軟件計算蛋白表達(dá)量。

內(nèi)參校正:使用β-actin或GAPDH等管家蛋白標(biāo)準(zhǔn)化數(shù)據(jù)。

磷酸化蛋白檢測:針對磷酸化位點的特異性抗體分析。

糖基化蛋白檢測:通過凝集素或糖基化抗體識別修飾。

膜蛋白提?。翰捎萌ス竸┨幚矸蛛x膜結(jié)合蛋白。

低豐度蛋白富集:免疫沉淀預(yù)處理提高檢測靈敏度。

多重檢測:同一膜上同時分析多個目標(biāo)蛋白。

檢測儀器

垂直電泳槽, 轉(zhuǎn)印裝置, 化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng), 熒光掃描儀, 微量分光光度計, 離心機(jī), 恒溫?fù)u床, 微波爐, 磁力攪拌器, pH計, 電子天平, 超純水系統(tǒng), 微量移液器, 凝膠成像系統(tǒng), 低溫高速離心機(jī)

實驗儀器

實驗室儀器 實驗室儀器 實驗室儀器 實驗室儀器

測試流程

代謝物免疫印跡檢測(Western Blot)流程

注意事項

1.具體的試驗周期以工程師告知的為準(zhǔn)。

2.文章中的圖片或者標(biāo)準(zhǔn)以及具體的試驗方案僅供參考,因為每個樣品和項目都有所不同,所以最終以工程師告知的為準(zhǔn)。

3.關(guān)于(樣品量)的需求,最好是先咨詢我們的工程師確定,避免不必要的樣品損失。

4.加急試驗周期一般是五個工作日左右,部分樣品有所差異

5.如果對于(代謝物免疫印跡檢測(Western Blot))還有什么疑問,可以咨詢我們的工程師為您一一解答。

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